NR1-TFR融合表位疫苗在脑缺血再灌注损伤大鼠模型中的作用研究

发布时间：2017-05-14 21:04

  本文关键词：NR1-TFR融合表位疫苗在脑缺血再灌注损伤大鼠模型中的作用研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的：脑缺血再灌注时，脑组织NMDAR的升高和激活可能是一个重要环节。我们前期研究的NR1-TfR重组疫苗可产生anti-NR1，透过血脑屏障。本研究通过制作大鼠脑缺血再灌注模型，观察致伤后神经行为学、神经元密度、局部谷氨酸等的变化，评价此疫苗在大鼠脑缺血再灌注模型中的作用。 方法：(1)将前期制作的NR1-TfR重组疫苗解冻复苏，通过基因测序，将测序正确的细菌通过平板菌落计数法，制成1X109cfu/ml单位的口服疫苗；（2）将72只SD大鼠随机分为三组：假手术组（sham经灌胃口服盐水2ml），盐水组（saline经灌胃口服盐水2ml），疫苗组（vaccine经灌胃口服疫苗2ml）。两周内灌胃四次，在末次灌胃后第四天开始造模。sham组仅分离双侧颈总动脉和股动脉监测动脉压，不造模；saline和vaccine组模型采用二血管阻断+低血压法建立脑缺血再灌注大鼠模型。再灌注后1h、24h观察其行为学评分，再灌注后24、48、72h，HE染色观察海马CA1区神经元密度，液相色谱-质谱/质谱联用方法检测脑脊液中的谷氨酸含量。 结果：1实验过程中，动物死亡情况由于灌胃导致大鼠死亡4只，造模过程中由于呼吸心跳骤停导致死亡三只。 2神经行为学评分缺血前大鼠神经行为学评分均正常（p0.05），再灌注后1h,sham组的评分高于saline组和vaccine组（P0.01）；再灌注24h时，sham组的评分均高于saline组和vaccine组（P0.01），saline组评分低于vaccine组（P0.05）。 3神经元密度再灌注24h，saline组和vaccine组的神经元密度均低于sham组（P0.01），saline组低于vaccine组（P0.01）；再灌注48h，saline组和vaccine组的神经元密集均低于sham组（P0.01），saline组低于vaccine组（P0.05）；再灌注72h，saline组的神经元密度低于sham组和vaccine组（P0.01）。 4谷氨酸的测定再灌注24h，sham组的GLU浓度低于saline组和vaccines组（P0.01），saline组的GLU浓度低于vaccine组（P0.01）；再灌注48h，sham组的GLU浓度低于saline组和vaccine组（P0.01）；再灌注72h，saline组的GLU浓度高于sham和vaccine组（P0.01）。 结论：1本研究中，大鼠脑缺血再灌注后，GLU浓度呈现先升高后降低，然后再升高的趋势：24h时升高，48h时降低，72h时再升高。 2NR1-TFR融合表位疫苗对大鼠的脑缺血再灌注可能产生了保护作用，但诸多环节尚待进一步明确。
【关键词】：脑缺血再灌注 NMDA受体 NMDA受体1 融合表位疫苗 谷氨酸 鼠
【学位授予单位】：泸州医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R-332;R392
【目录】：

• 摘要4-6
• Abstract6-9
• 前言9-11
• 第一部分 NR1-TFR融合表位疫苗的复苏和制备11-17
• 材料与方法11-14
• 结果14-15
• 讨论15-16
• 结论16-17
• 第二部分 NR1-TFR 融合表位疫苗在脑缺血再灌注损伤大鼠模型中的作用17-42
• 材料与方法18-26
• 结果26-35
• 讨论35-42
• 全文结论42-43
• 参考文献43-48
• 英汉缩略词对照48-49
• 致谢49-50
• 综述50-61
• 参考文献57-61

【参考文献】

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本文编号：366227