转基因食品致敏性评价BALB/c小鼠动物模型和RBL-2H3细胞模型研究

发布时间：2022-10-09 17:25

　　随着转基因作物的快速发展,转基因食品的安全性成为人民群众关心的问题,其中,转基因食品引起食物过敏的可能性是人们关注的焦点之一。目前,使用动物模型和细胞模型评价转基因作物的致敏性是国际上研究和开发的热点领域,正确应用动物模型和细胞模型,以及其他评价方法能够有效地对转基因食品致敏性进行评价。本研究应用已知致敏原卵清蛋白（OVA）建立腹腔注射致敏BALB/c小鼠模型,并使用不同致敏强度的蛋白（花生凝集素、p-乳球蛋白和马铃薯酸性磷酸酶）来验证该模型的可行性；此外,本研究还对RBL-2H3细胞作为转基因食品致敏细胞模型的可行性进行了初步探讨。 1. BALB/c小鼠致敏模型的建立 目的：建立BALB/c、鼠致敏动物模型,探讨腹腔注射途径下BALB/c小鼠模型的最佳致敏剂量和致敏频次,研究最适致敏周期和动物性别。 方法：（1）致敏剂量实验：64只BALB/c小鼠随机分成4组,每组16只,雌雄各半。分别腹腔注射给予0.25mL含0mg、0.05mg、0.5mg和5mg OVA的PBS溶液（浓度为Omg/mL、0.2mg/mL、2mg/mL和20mg/mL）,注射时间为第0、3、6... 

【文章页数】：118 页

【学位级别】：硕士

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本课题受资助情况
目录
缩略词表
摘要
Abstract
前言
    1 食物过敏
    2 转基因食品安全性评价
    3 小结
    4 本研究目的及意义
第一章 BALB/c小鼠致敏模型的建立
    引言
    1 材料与试剂
        1.1 实验动物
        1.2 主要试剂
        1.3 试剂配制
    2 实验方法
        2.1 动物分组
        2.2 血样处理方式
        2.3 血清中OVA特异性IgE测定
        2.4 血清中OVA特异性IgG1测定
    3 数据统计和分析
    4 实验结果
        4.1 剂量实验
        4.2 致敏次数实验
        4.3 致敏周期实验
        4.4 性别比较实验
    5 讨论
        5.1 致敏剂量分析
        5.2 致敏次数分析
        5.3 致敏周期分析
        5.4 性别分析
    6 本章小结
第二章 BALB/c小鼠致敏模型的验证
    引言
    1 材料与试剂
        1.1 实验动物
        1.2 主要试剂和仪器
        1.3 试剂配制
    2 实验方法
        2.1 动物分组及处理方式
        2.2 血清中蛋白特异性IgE测定
        2.3 血清中蛋白特异性IgG测定
        2.4 血清中蛋白特异性IgG1测定
        2.5 脾细胞培养和细胞因子测定
        2.6 小鼠激发后进行肛温测定和临床症状观察
        2.7 血浆中组胺的测定
        2.8 组织病理检查
    3 数据统计和分析
    4 实验结果
        4.1 血清中蛋白特异性IgE
        4.2 血清中蛋白特异性IgG
        4.3 血清中蛋白特异性IgG1
        4.4 细胞因子-IL-4和IFN-γ
        4.5 激发后小鼠过敏反应临床症状
        4.6 激发后小鼠的肛温
        4.7 血浆中的组胺
        4.8 组织病理检查
    5 讨论
        5.1 细胞因子分析
        5.2 致敏原特异性IgE、IgG和IgG1分析
        5.3 组胺分析
        5.4 肛温分析
        5.5 组织病理分析
    6 本章小结
第三章 RBL-2H3细胞模型的初步探索
    引言
    1 材料与试剂
        1.1 实验动物血清
        1.2 实验细胞
        1.3 主要试剂和仪器
        1.4 试剂配制
    2 实验方法
        2.1 细胞准备
        2.2 实验步骤
    3 数据统计和分析
    4 实验结果
        4.1 RBL-2H3细胞的正常形态
        4.2 β-氨基己糖苷酶测定的可靠性
        4.3 β-氨基己糖苷酶释放率
    5 讨论
    6 本章小结
结论
    1 BALB/C小鼠致敏模型的建立
    2 BALB/c小鼠致敏模型的验证
    3 RBL-2H3细胞模型的初步探索
参考文献
致谢
个人简历
文章附录
    参考文献


【参考文献】：
期刊论文
[1]转基因作物产业化现状及我国的发展策略[J]. 李建平,肖琴,周振亚,耿瑜.  农业经济问题. 2012(01)
[2]转基因食品致敏性评价啮齿类动物模型研究进展[J]. 孙拿拿,彭于发,贾旭东,李宁.  中国食品卫生杂志. 2009(05)
[3]肥大细胞组胺体外释放模型在食品过敏原分析中的应用[J]. 刘婉莹,向军俭,蒋红玲,王宏,唐勇.  食品科学. 2008(08)
[4]食物过敏原及检测技术的研究进展[J]. 顾可飞,李春红,高美须,潘家荣.  食品科技. 2006(08)
[5]食物过敏研究进展[J]. 李志君.  职业与健康. 2006(13)
[6]转基因食品致敏性评价[J]. 贾旭东.  卫生毒理学杂志. 2005(02)
[7]食品过敏原体外激发小鼠致敏肥大细胞组胺释放[J]. 向军俭,张在军,毛露甜,邓宁,杨红宇.  广东医学. 2005(05)
[8]蛋白过敏性研究——BN大鼠动物模型[J]. 贾旭东,李宁,王伟,吴永宁,杨晓光.  卫生研究. 2004(01)

硕士论文
[1]转基因食品致敏性评价啮齿类动物模型（BN大鼠和C3H/HeJ小鼠）研究[D]. 孙拿拿.中国农业科学院 2010
[2]利用RBL-2H3细胞研究双黄连等中药注射液的过敏性[D]. 罗霞.广州中医药大学 2009



本文编号：3689049