慢病毒介导的稳定表达miR-23b的骨髓间充质干细胞株的建立

发布时间：2022-12-09 04:56

　　目的 通过慢病毒包装系统感染小鼠骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs）,建立能够稳定、高效表达microRNA-23b（miR-23b）的细胞株miR23b-BMSCs。方法 从C57BL/6小鼠股骨及胫骨分离出来的原代BMSCs,经过多次传代培养,依然能保持干细胞特有的螺旋生长状态以及自我更新的潜能。利用带有pre-miR23b基因的质粒pEZX-MR03与pMDLg/pRRE、pRSV Rev、pLP/VSVG进行慢病毒包装,收集病毒液感染BMSCs,显微镜下观察带有eGFP荧光标记的间充质干细胞,利用嘌呤霉素（2.5 μg/mL）进行药筛。结果 成功筛选出稳定表达miR-23b的BMSCs,提取干细胞内RNA进行逆转录、实时荧光定量PCR（real-time fluorescent quantitative PCR,qPCR）进行表达鉴定。qPCR结果显示,过表达BMSCs组miR-23b的表达量较对照组BMSCs提高100倍（t＝4.572,P＆lt;0.05）。结论 利用慢病毒包装可以成功地将miR-23b整合到干... 

【文章页数】：6 页

【参考文献】：
期刊论文
[1]哮喘中miR-155的表达变化及其对Th细胞分化的影响[J]. 刘希君,沈亚琪,秦虹,胡瑞雪,王广友,李呼伦.  国际免疫学杂志. 2018 (04)



本文编号：3714869