SD大鼠少突胶质前体细胞的纯化及氧糖剥夺对其活性的影响

发布时间：2022-12-22 00:01

　　目的:纯化少突胶质前体细胞,并探讨氧糖剥夺不同时间对其活力的影响。方法:取SD乳鼠的脑皮质,采用差速贴壁、振荡分离纯化、限定培养基定向培养法,获取少突胶质前体细胞。镜下观察少突胶质前体细胞分化过程中各阶段细胞的形态变化。采用特异性抗体A2B5、MBP、GFAP、IBA-1标记纯化后少突胶质前体细胞、成熟少突胶质细胞、星形胶质细胞和小胶质细胞所占比例,以此分析纯化后的细胞纯度。体外制备细胞氧糖剥夺（oxygen glucose deprivation,OGD）模型,采用CCK-8法观察其对少突胶质细胞系增殖活性的影响。结果:（1）利用针对少突胶质前体细胞、成熟少突胶质细胞、星形胶质细胞和小胶质细胞的特异性抗体A2B5、MBP、GFAP和IGB-1进行标记,A2B5、MBP染色阳性细胞分别占96.2%、2.1%,GFAP和IBA-1染色阳性细胞小于3%。（2） MTT检测显示,随着OGD干预时间的延长,细胞活力呈降低的趋势。结论:（1）联合应用差速贴壁、恒温振荡分离和条件限定培养基可以获得高纯度的少突胶质前体细胞;（2）干预3 h适宜用于体外少突胶质前体细胞的OGD模型。体外建立的OGD模... 

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
        1.1.1 实验动物
        1.1.2 试剂
        1.1.3 主要仪器设备
    1.2 方法
        1.2.1 新生SD大鼠脑皮质混合胶质细胞培养
        1.2.2 OPCs的纯化分离培养
        1.2.3 纯化后各细胞的免疫荧光法鉴定
        1.2.4 OGD的建立及OGD的不同干预时间对OPCs活力的影响
        1.2.5 MTT检测OGD干预后细胞的活力
2 结 果
    2.1 混合胶质细胞形态和分化情况
    2.2 纯化后细胞形态观察
    2.3 纯化后的免疫荧光染色鉴定、纯度分析及形态分析
    2.4 OGD对少突胶质细胞活力的影响
3 结 论


【参考文献】：
期刊论文
[1]抚触疗法对缺氧缺血性脑病患儿心理及神经精神发育的影响分析[J]. 吕丽艳,林杉,丁艺,姜曼.  现代医学. 2018(11)
[2]缺血致新生大鼠脑室周围白质软化和远期神经行为变化[J]. 胡燕,蒋犁,张敏,乔立兴.  东南大学学报(医学版). 2009(02)
[3]硒和B-27添加剂在神经干细胞存活与分化中的作用[J]. 田东萍,苏敏,吴贤英,张舸.  中华预防医学杂志. 2005(05)



本文编号：3723026