人β-防御素2联合乙肝疫苗免疫BALB/c小鼠的免疫效果评价

发布时间：2024-02-25 10:26

　　目的： 研究人β-防御素2促进树突状细胞成熟的作用及其对乙肝疫苗免疫BALB/c小鼠免疫功能的影响。 方法： 1.用重组小鼠IL-4(10ng/mL)、GM-CSF(20ng/mL)诱导小鼠骨髓细分化培养胞6天，通过倒置显微镜观察细胞集落形成，同时用流式细胞仪检测细胞表面分子（CD11c、MHCII、CD80、CD86）。 2.用浓度分别为0ng/mL、12.5ng/mL、25ng/mL、50ng/mL、100ng/mL的HBD2刺激培养BMDCs24h，通过qRT-PCR检测IL-6、IL-12p40mRNA表达，通过流式细胞仪检测MHCII、CD11C、CD80、CD86阳性细胞百分率。 3.将小鼠随机分2组：分别在大腿内侧肌注射PBS200uL/只和HBD2300ng/只，并分别在注射后第4h、8h、12h眼眶采血和无菌条件下摘取脾脏。ELISA检测血清IL-12p70、IFN-γ含量，并采用qRT-PCR检测脾组织IL-6、IL-12p40、IFN-γ mRNA表达。 4.将40只4-6周龄雌性BALB/c小鼠随机均分为4组，前3组分别于大腿内侧肌肉注射PBS200uL、乙肝疫...

【文章页数】：58 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图3.1骨髓细胞不同培养时间生长状态图A第1天BMDC倒置显微镜观察（×100）图B第2天BMDC倒置显微镜观察（×100）

倒置显微镜下观察发现，培养第1天可见大量圆形细胞密集生长（见图3.1A）；第2天可见大量点状细胞集落（见图3.1B），第3天见呈簇状生长的细胞集落（见图3.1C）；第5天较多细胞呈半悬浮生长，并可见大量集落（见图3.1D）；第6天可见大量细胞从集落脱离，呈悬浮生....

图3.2培养第六天细胞表面分子表达情况（%）

图3.2培养第六天细胞表面分子表达情况（%）3.2HBD2诱导BMDCs成熟的鉴定和表达细胞因子的检测3.2.1流式细胞仪对BMDCs表面分子的检测将培养第6天的BMDCs细胞用不同浓度(0ng/mL、12.5ng/mL、25ng/mL、50ng/mL....

图3.3不同浓度HBD2诱导BMDCs表面分子表达情况(%)

16图3.3不同浓度HBD2诱导BMDCs表面分子表达情况(%)3.2.2HBD2对BMDCs细胞因子IL-6、IL-12p40mRNA表达影响3.2.2.1RNA纯度的鉴定用紫外分光光度计分别测定各样品RNA（1:200稀释）的OD值，OD....

图3.5基因Mrnade扩增与溶解曲线

图3.4RNA电泳结果3.2.2.3qRT-PCR测定IL-6、IL-12p40、β-actinmRNA的扩增和溶解曲线qRT-PCR测定IL-6、IL-12p40、β-actinmRNA扩增和溶解曲线见图3.5。由图可见各样本中IL-6、IL-12p....

本文编号：3910190