衰老原代小鼠成骨细胞模型的建立与评价

发布时间：2024-02-29 08:49

　　目的提取小鼠颅骨原代成骨细胞,并建立成骨细胞衰老模型。方法取5只新出生5～7 d的昆明乳鼠颅骨,采取酶消化法与组织块培育法获取原代成骨细胞,经鉴定后,采用D-半乳糖诱导成骨细胞衰老,行β-半乳糖苷酶衰老染色、RT-PCR法分析ALP,BMP-2的表达。结果光学显微镜下观察细胞呈三角形,长梭形,不规则多边形,碱性磷酸酶染色呈阳性且阳性率为90%。经D-半乳糖处理后,成骨细胞β-半乳糖苷酶衰老染色阳性细胞数较对照组阳性细胞数显著增多(P<0.01),RT-PCR结果表明衰老成骨细胞中mRNAALP,BMP-2的表达较对照组均显著降低(P<0.05)。结论该研究采取D-半乳糖诱导法成功建立了小鼠原代成骨细胞衰老模型。

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【部分图文】：

图1不同天数细胞爬出骨片状况

按照2^－△△Ct计算基因相对表达量。表1引物序列2.8统计方法应用SPSS25.0统计学软件进行数据比较分析。组间比较（x±s）表示，采用t检验，P＜0.05为差异有统计学意义。3实验结果3.1倒置相差显微镜下观察细胞形态骨块贴壁2d后有细胞自骨碎片爬出，贴壁逐渐展开（如图1A....

图3成骨细胞β-半乳糖苷酶染色情况分析

·论著·系统医学SYSTEMSMEDICINE系统医学2019年8月第4卷第16期照组相比，D-半乳糖处理组阳性细胞数显著增多（P<0.01），如图3。图3成骨细胞β-半乳糖苷酶染色情况分析注：A.成骨细胞β-半乳糖苷酶染色情况，a为对照组，b为D半乳糖处理组(10×)；B.成骨....

图4成骨细胞基因BMP2及ALP表达变化

图2原代细胞碱性磷酸酶染色观察（A:×4B:×100）

民,章岚.自噬对成骨细胞调控作用的研究进展[J].中国骨质疏松杂志,2018,24(11):1535-1540.[3]汪琳.老年血液通过CCL11加速年轻小鼠骨量丢失的研究[D].上海：中国人民解放军海军军医大学;海军军医大学,2018.[4]胡孝丽,王佳宇,余和东,等.大鼠胎鼠....

本文编号：3914652