青蒿琥酯作用日本血吸虫童虫的iTRAQ定量蛋白质组学分析

发布时间：2017-05-25 21:08

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【摘要】：血吸虫病是一种由寄生在肠系膜门静脉系统的裂体吸虫引起的感染性疾病,是七大被忽视的热带病之一,构成了热带和亚热带逾76个国家和地区严重的公共卫生问题。全球范围内目前约有2.49亿人感染血吸虫病,约7亿人存在感染风险。尽管流行区内实施了血吸虫病的防控工作,全球血吸虫病的发病率仍在上升。据估算,在2012年,中国约有24万人感染血吸虫病,日本血吸虫病依然是中国的一个重要的公共卫生问题。短期内除积极灭螺之外,药物化学治疗仍然是防治血吸虫病的有效方法。抗疟药青蒿素的衍生物青蒿琥酯,也发现有抗血吸虫的作用。从20世纪90年代开始,我国进行了大量抗血吸虫病的药物研究。研究显示青蒿琥酯能够有效杀灭日本血吸虫7d童虫,具有较好的防治日本血吸虫病的效果。虽然青蒿琥酯已经广泛地应用于血吸虫病的预防性治疗,但是青蒿琥酯抗日本血吸虫的确切机制仍不清楚。 目的 研究青蒿琥酯作用日本血吸虫童虫的蛋白质组差异表达谱,分析青蒿琥酯抗日本血吸虫童虫蛋白质基础,为进一步青蒿琥酯作用日本血吸虫童虫的分子机制研究奠定基础。 方法 新西兰兔经贴片法感染日本血吸虫尾蚴(2000条/只)7d后,实验组以8mg/kg剂量灌服青蒿琥酯(溶于1%羧甲基纤维素钠),对照组灌服同体积的1%羧甲基纤维素钠,10d后经肝门静脉系统灌流收集童虫,提取虫体总蛋白。应用iTRAQ结合高效液相串联质谱技术鉴定青蒿琥酯给药前后日本血吸虫童虫的蛋白质组,通过数据库检索筛选差异表达的蛋白质。运用qRT-PCR技术对质谱鉴定的部分差异表达蛋白进行验证。生物信息学方法分析差异表达蛋白的定位与功能分类。 结果 本研究共鉴定得到日本血吸虫童虫蛋白2835个。青蒿琥酯给药后表达量有显著性差异的蛋白75个(含3个未知蛋白),其中表达量上调的蛋白23个,下调的蛋白52个。差异表达蛋白质的qRT-PC验证结果与iTRAQ鉴定结果相一致。生物信息学分析表明,差异表达的蛋白质主要参与了童虫的代谢、生物调节和细胞稳态等过程,同时与应激,细胞组织和生成等密切相关。 结论 首次应用iTRAQ定量蛋白质组学技术研究了青蒿琥酯作用日本血吸虫童虫的蛋白质差异表达谱,为青蒿琥酯抗日本血吸虫的分子机制研究奠定了基础。
【关键词】：日本血吸虫 童虫 青蒿琥酯 同位素相对标记与绝对定量技术 荧光定量PCR
【学位授予单位】：浙江省医学科学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R383.24
【目录】：

• 中文摘要5-7
• ABSTRACT7-9
• 前言9-14
• 材料与方法14-24
• 结果与分析24-42
• 讨论与建议42-45
• 参考文献45-50
• 综述50-63
• 参考文献58-63
• 致谢63-64
• 附件1 攻读学位期间发表论文目录64-65
• 附件2 攻读学位期间参加课题情况65-66
• 附件3 英文缩略词汇66

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前5条

1 钟敏;刘晓力;刘晓加;杜庆锋;许娜;刘志;林榕;夏立平;苏群豪;;青蒿琥酯诱导K562细胞凋亡过程中的氧化损伤机制[J];广东医学;2013年18期

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4 李怀宝;;日本血吸虫病的综合防治与公共卫生安全[J];畜牧与饲料科学;2010年01期

5 欧阳s

本文编号：394994