双价痢疾菌苗粘膜免疫保护机制及其作为基因治疗载体的初步探讨

发布时间：2024-04-15 02:39

　　已知机体95％以上的感染发生在粘膜或由粘膜入侵，尤其是呼吸道和消化道粘膜，直接面对外界环境，时时刻刻接触大量繁杂的抗原，包括病原体。因此，粘膜是病原体感染和疫苗免疫最重要也是最常见的途径。和系统免疫相比，粘膜具有其独特的性质，随着人们对粘膜特性的认识的深入，粘膜疫苗和粘膜免疫成为感染免疫学和预防医学的研究热点和前沿，研究粘膜疫苗免疫反应规律和保护机制，是粘膜疫苗研制、改进及制定免疫实施方案的重要理论基础。通过应用粘膜疫苗载体和粘膜免疫可以解决基因疫苗和基因治疗中的一些尚难以解决的问题，近年来倍受基因疫苗和基因治疗研究者的青睐。因此，粘膜疫苗的免疫保护机制及作为外源DNA的携带载体的研究具有重要的理论意义和实际意义。本文就我室构建的两类不同侵袭表型的双价痢疾菌苗，研究不同动物模型、不同粘膜途径的免疫反应和保护机制，并就其作为基因治疗载体的可能性进行了初步研究。 FSM-2117和FS-5416(FS-5402，5411，5414)是我室构建的两类具有不同侵袭表型的福氏、宋内氏双价痢菌苗株，它们共同的特点是都稳定表达了福氏及宋内氏双价LPS-O抗原，不同之处是前者不表达侵袭蛋白抗原...

【文章页数】：113 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图4:IPa一和IPa+双价痢疾基因工程菌苗不同粘膜免疫后局部特异性抗体的变化

2.6四株侵袭性双价痢疾菌苗眼粘膜免疫豚鼠后泪液中抗体反应四株侵袭性双价痢疾菌苗和一株非侵袭性双价痢疾菌苗8xl护一lxl护滴眼免疫后，隔日一次，共7次。末次免疫后第七天取泪液测定双价特异性抗体。由图4可见，免疫后两类双价痢疾菌苗组泪液中福氏、宋内双价特异性IgA、IgG都较对照....

图17重组克隆载体的鉴定

论文第二部分双价痢疾菌苗作为DNA治疗载体的初步研究(2)双酶切鉴定:由于外源片段是通过双酶切后连入载体的，故用这两个酶切割重组质粒时可获得TRAIL或STRAIL和载体两个片段。如图17A、B、C所示，酶切实验进一步证明三个重组质粒中分别含有T队IL846bP、843bp、50....

图20原核表达载体pGEx一KG一TRAIL的鉴定F1920IdentifieationofexPressionPlasmidPGEX一K

论文第二部分双价痢疾菌苗作为DNA治疗载体的初步研究获得原核表达载体，菌落PCR和双酶切鉴定阳性克隆(图20)。P3，Hilldlll.，，，solbp片身嗽~-、一、、一丫zP4T4liZaseBamHI珑ndlll/托ndln/产\、训/图19:重组质粒pGEM一T-sTRA....

本文编号：3955607