NO/NOS在侧支血管生长中对血管VE-cadherin表达及通透性的影响

发布时间：2024-05-20 04:55

　　第一部分股动脉结扎诱导的侧支血管生长及血管VE-cadherin表达和通透性变化 目的：研究细胞粘附连接中的重要分子—血管内皮钙粘蛋白(vascular endothelial-cadherin, VE-cadherin)表达和血管通透性在大鼠股动脉结扎诱导的侧支血管生长过程中的改变情况,探讨VE-cadherin表达、通透性变化对侧支血管生长的影响,丰富侧支血管生长机制中的炎症形成理论。 方法：成年Sprague-Dawley (SD)大鼠45只,分为正常对照组、假手术组和股动脉结扎组。股动脉结扎组大鼠行股动脉结扎以诱导侧支血管生长。存活1周和4周,采用明胶-四氧化三铅血管造影、苏木素-伊红(Hematoxylin-eosin staining, H.E.)染色和共聚焦免疫荧光组织化学等方法,观察大鼠股动脉结扎后的侧支血管生长的情况和VE-cadherin表达变化,并用伊文思蓝(Evance blue, EB)通透性实验检测血管通透性变化。 结果：股动脉结扎组动物存活1周后,可见侧支血管呈网状分布,与假手术组比较,侧支血管数目和管腔面积均增加；Ki67(细胞增殖标志物)表达增加,血管...

【文章页数】：115 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
目录
1 绪论
2 股动脉结扎诱导的侧支血管生长、VE-cadherin表达和通透性变化
    2.1 材料与方法
        2.1.1 试剂及设备
        2.1.2 实验动物分组及动物模型
        2.1.3 取材、保存与切片
        2.1.4 血管造影
        2.1.5 H.E.染色
        2.1.6 VE-cadherin、Ki67的免疫荧光组织化学染色
        2.1.7 血管通透性实验
        2.1.8 结果观察
        2.1.9 数据分析
    2.2 实验结果
        2.2.1 血管造影结果
        2.2.2 H.E.染色结果
        2.2.3 股动脉结扎后诱导的侧支血管的增殖情况
        2.2.4 股动脉结扎后诱导的侧支血管VE-cadherin表达的变化
        2.2.5 股动脉结扎后诱导的侧支血管通透性的变化
    2.3 讨论
        2.3.1 股动脉结扎诱导的侧支血管生长
        2.3.2 股动脉结扎诱导的侧支血管生长过程中VE-cadherin表达和通透性变化
3 NO/NOS对侧支血管生长过程中VE-cadherin表达和通透性的影响
    3.1 材料与方法
        3.1.1 试剂及设备
        3.1.2 实验动物分组及动物模型
        3.1.3 血管通透性实验
        3.1.4 取材与切片
        3.1.5 VE-cadherin、eNOS、iNOS、Ki67、CD11b、CD31的免疫荧光组织化学染色
        3.1.6 结果观察
        3.1.7 数据分析
    3.2 实验结果
        3.2.1 NO供体和NOS抑制剂对侧支血管增殖的影响
        3.2.2 NO供体和NOS抑制剂对侧支血管炎症的影响
        3.2.3 NOS抑制剂对侧支血管eNOS、iNOS的影响
        3.2.4 NO供体和NOS抑制剂对侧支血管VE-cadherin的影响
        3.2.5 NO供体和NOS抑制剂对血管通透性的影响
        附图
    3.3 讨论
        3.3.1 NOS在股动脉结扎诱导的侧支血管中的表达
        3.3.2 NO/NOS对侧支血管VE-cadherin表达、通透性的影响
        3.3.3 NO/NOS—VE-cadherin—通透性通路在侧支血管生长过程中对单核细胞/巨噬细胞的浸润的影响
4 NO/NOS对体外培养血管内皮细胞VE-cadherin的表达、细胞增殖和通透性的影响
    4.1 材料与方法
        4.1.1 实验试剂、材料和设备
        4.1.2 细胞传代培养及鉴定
        4.1.3 实验分组及处理
        4.1.4 NO产物浓度的测定
        4.1.5 体外HUVEC细胞通透性实验
        4.1.6 MTT比色法检测内皮细胞活性的影响
        4.1.7 HUVEC细胞CD31、VE-cadherin、eNOS、和Ki67的免疫荧光细胞化学染色
        4.1.8 Western Blot检测HUVEC细胞VE-cadherin、eNOS的表达
        4.1.9 数据收集
        4.1.10 统计学分析
    4.2 实验结果
        4.2.1 传代的HUVEC细胞形态和鉴定结果
        4.2.2 NO产物检测结果
        4.2.3 DETA NONOate和L-NAME对HUVEC细胞通透性的影响
        4.2.4 MTT比色法检测HUVEC细胞的活性结果
        4.2.5 DETA NONOate和L-NAME对HUVEC细胞Ki67表达的影响
        4.2.6 L-NAME抑制HUVEC细胞eNOS表达
        4.2.7 DETA NONOate、L-NAME对HUVEC细胞VE-cadherin表达的影响
        附图
    4.3 讨论
        4.3.1 NO/NOS对血管内皮细胞VE-cadherin表达的影响
        4.3.2 NO/NOS对血管内皮细胞增殖的影响
5 结论
参考文献
综述
    参考文献
攻读学位期间主要的研究成果目录
致谢



本文编号：3978989