诱导脐血造血干/祖细胞分化为红系祖细胞及其规模化扩增

发布时间：2024-05-21 00:53

　　目前血液来源紧张及输血相关传染病的发生使得临床输血治疗面临巨大的挑战,寻找更为安全、充足的血液来源一直以来都是输血医学研究的重要方向。干细胞技术的不断发展使得我们有可能在体外将干细胞定向诱导分化为红细胞作为血液替代来源,然而目前的技术条件下生产制备干细胞来源的成熟红细胞产品面临很多困难,而干细胞来源的红系祖细胞同样可以作为非应急性(或择期)输血的血液替代产品。本研究拟利用脐带血造血干/祖细胞作为起始细胞,体外诱导其向红系祖细胞分化,并添加小分子化合物对诱导扩增体系进行优化,初步探讨利用生物反应器规模化制备脐带血来源的红系祖细胞的技术方法。本课题研究首先建立了无血清体系中高效诱导脐带血造血干/祖细胞向红系祖细胞分化的技术方法,诱导效率超过90%,对获得的红系祖细胞进行了多方而的鉴定,并对诱导的红系祖细胞的不同分化阶段进行了动力学分析。为了进一步优化诱导扩增体系,实现规模化扩增脐带血造血干/祖细胞来源的红系祖细胞,本研究尝试在诱导扩增体系中添加一种小分子化合物“二甲基乙二酰基甘氨酸”(Dimethyloxalylglycine, DMOG),在体外模拟低氧微环境,提高红系祖细胞诱导扩增效率...

【文章页数】：85 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
符号说明
1 前言
2 红系祖细胞诱导扩增体系的建立
    2.1 红系祖细胞诱导扩增体系的建立与验证
        2.1.1 材料与方法
        2.1.2 实验结果
    2.2 诱导扩增后红系祖细胞的表型与功能鉴定
        2.2.1 材料与方法
        2.2.2 实验结果
    2.3 讨论
    2.4 小结
3 红系祖细胞诱导扩增体系的优化
    3.1 添加小分子优化红系诱导扩增体系
        3.1.1 材料与方法
        3.1.2 实验结果
    3.2 Fed-batch的二维模拟优化培养模式
        3.2.1 材料与方法
        3.2.2 实验结果
    3.3 讨论
    3.4 小结
4 红系祖细胞的规模化扩增
    4.1 利用WAVE生物反应器扩增红系祖细胞
        4.1.1 材料与方法
        4.1.2 实验结果
    4.2 红系祖细胞的体内存活及安全性检测
        4.2.1 材料与办法
        4.2.2 实验结果
    4.3 讨论
    4.4 小结
5 结论
参考文献
综述
    参考文献
攻读学位期间的主要研究成果目录
致谢



本文编号：3979369