应用形态学与PCR技术鉴定黄胸鼠和黄毛鼠体内锥虫

发布时间：2017-05-27 03:09

  本文关键词：应用形态学与PCR技术鉴定黄胸鼠和黄毛鼠体内锥虫，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的应用形态学和PCR方法对浙江省发现的两例疑似感染锥虫的鼠血样进行鉴定。方法采集两例疑似感染锥虫的鼠血样,制作血涂片进行显微镜检查,测量锥虫的相关形态学指标。提取两例鼠血样DNA,应用PCR法扩增锥虫属18S r RNA基因特异性片段。扩增产物测序后,应用NCBI中Blast分析程序对测序序列进行比对分析,并将测序序列提交至Gen Bank。结果两份疑似感染锥虫的鼠血样分别来源于野外黄毛鼠和室内黄胸鼠。制作血涂片进行显微镜检查,测量锥虫的相关形态学指标。镜下观察发现,血涂片中的锥虫均具备核、鞭毛和动基体等锥虫特征性结构。分离自黄毛鼠和黄胸鼠的锥虫总体长分别为27.50μm和23.80μm,游离鞭毛的长度分别为9.60μm和9.20μm,核指数分别为0.74和1.05,动基体指数分别为1.40和1.57,属于啮齿动物内寄生的匍锥虫亚属(Herpetosoma)锥虫。应用PCR法扩增锥虫属18S r RNA基因的特异性片段,片段大小约为700 bp,对扩增产物测序后将序列提交至Gen Bank,登录号分别为KP098535和KP098536。分离自黄毛鼠锥虫的18S r RNA基因序列(KP098535)与Trypanosoma rabinowitschae(AY491765.1)、T.blanchardi(AY491764.1)和T.musculi(AJ223568.1)等序列的18S r RNA基因序列的同源性均为100%,可以确定其为匍锥虫亚属,但尚不能确定具体种。分离自黄胸鼠锥虫的序列(KP098536)与Gen Bank中路易斯锥虫(T.lewisi)的18S r RNA基因序列(AB242273.1和AJ009156.1)的同源性为100%,可判定其为路易斯锥虫。结论分离自黄胸鼠的锥虫为路易斯锥虫,分离自黄毛鼠的锥虫隶属于匍锥虫亚属,可判为类路易斯锥虫。
【作者单位】： 浙江省疾病预防控制中心;温州市疾病预防控制中心;
【关键词】： 锥虫 路易斯锥虫 黄胸鼠 黄毛鼠 PCR
【基金】：浙江省医药卫生科技项目(No.2013KYA041,201485447) 卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室(No.WSBKTKT201306)~~
【分类号】：R384
【正文快照】： (1 Zhejiang Provincial Center for Disease Control and Prevention,Hangzhou 310051,China;2Wenzhou Center for Disease Control and Prevention,Wenzhou 325001,China)products were about 700 bp by 18S r RNA gene PCR with the DNA isolated from the trypanosomes.Th

【参考文献】

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【共引文献】

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【二级参考文献】

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