Krüppel样因子4（KLF4）对破骨细胞发生及功能影响的初步研究

发布时间：2024-06-03 00:24

　　目的： 1.构建带有雌激素受体编码区的KLF4真核表达载体,并筛选出对小鼠巨噬细胞系RAW264.7形成稳定转染的细胞株,观察经Tamoxifen诱导的重组载体是否可入胞核内表达。 2.观察KLF4基因对小鼠巨噬细胞系Raw264.7细胞向破骨分化及其功能的影响,并对其机制进行初步探讨。 3.探讨使用CD11b-Cre小鼠和KLF4loxp小鼠杂交后得到在破骨前体细胞及破骨细胞中特异性敲除KLF4转基因小鼠模型的可行性,了解KLF4敲除后的破骨前体细胞对破骨分化及其功能的影响。 方法： 1.扩增KLF4全长片段,将改良型小鼠雌激素受体(oestrogen receptor, ER)的激素链接区(hormone binding domain, HBD)(MOR G525R)序列与之融合后插入pCGF5-IEGZ载体中,转染并筛选稳定表达的RAW264.7细胞株,流式细胞仪检测筛选的转染效率,Q-PCR及Western blot检测KLF4的表达；DAPI核染色观察经Tamoxifen诱导后重组载体转运胞核中的表达情况。 2. Realtime-PCR及Western blot检测正常RA...

【文章页数】：106 页

【学位级别】：博士

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目录
中文摘要
ABSTRACT
前言
第一部分
    前言
    材料与方法
    结果
    讨论
    参考文献
第二部分
    前言
    材料与方法
    结果
    讨论
    参考文献
第三部分
    前言
    材料与方法
    结果
    讨论
    参考文献
综述
    参考文献
附录一
附录二
致谢



本文编号：3987897