抗病毒及抗膜补体调节蛋白双特异性抗体的制备及效应研究

发布时间：2024-06-08 07:13

　　补体系统在机体的抗病毒免疫中处于一线防御地位，是病毒建立感染所必须面对和克服的机体的第一道防线。作为机体重要的天然免疫防御系统及特异性体液免疫应答的重要效应系统，补体系统除了具有溶解、清除病毒等致病微生物，阻止病毒进入靶细胞，调理病毒的吞噬等重要功能外，还可通过“识别”自身组织细胞表面的补体活化调节蛋白来对自身细胞加以保护，使之不受侵害。遗憾的是，一些有包膜的病毒也在长期的演化过程中获得了补体系统的这种自我保护机制，即可以通过结合宿主膜补体调节蛋白来逃避补体的攻击。病毒免疫逃避的机制也可能是我们寻求有效的抗病毒治疗的靶点。因此我们设想，1)是否可以通过封闭病毒表面补体活化调节蛋白的功能来消除病毒逃避补体攻击的机制，恢复病毒对补体攻击的敏感性?2)由于膜补体调节蛋白在体内广泛表达，是否可以通过制备针对病毒及其表面补体活化调节蛋白的双特异性抗体来实现特异性封闭病毒表面的补体调节蛋白，同时利用抗体的Fc段诱导内源性补体活化，提高补体抗病毒的效率的目的? 为了验证我们的设想，本研究进行了下面三部分的实验。 1．以严重危害人类健康，且具有复杂免疫逃避机制的有包膜的HIV病毒及痘苗...

【文章页数】：147 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图I一6:CD59在EEV上存在的westernBlot结果，结果示Hela细胞(5)及三组纯化

2345EEv上存在的westernBlot结果，结果示Hela(1)细上(3，4，5)有特异性的条带，分子量为70kd左右，。2345

图2一3:SDS一队GE结果显示抗体纯化后条带均一

3579111315171921232527293133353739管号图2一1兔抗EEV抗体纯化洗脱图C的e司OO图2一2:CD55单抗纯化洗脱图

图3一l:CD55单抗杂交瘤细胞DG3总RNA的提取电泳图，图示RNA电泳的完整性好，三条带清晰

使液体被吸收。培养12一16小时，可见菌落长提取后，分别进行限制性内切酶选及鉴定:按试剂盒说明书进行(上海华舜co班酶切筛选插入PCR扩增产aRa公司完成BL基因库检索(网址)灯embl/Submission/webin.html鉴定:将提取的总RNA进行电泳型完整，没有明显的降....

图3一2CD55单抗VH、VL的PCR扩增，图示CD55单抗重链及轻链均有特异性条带出现，大小分别为35obp(1)及31obp(2)左右，与预期的分子量相符

‘一185~55图3一l:CD55单抗杂交瘤细胞DG3总RNA的提取电泳图，图示RNA电泳的完整性好，三条带清晰。提示可以用作下一步RT一PCR模板。

本文编号：3991647