C.jejuni在不同条件下的形态学变化及GBS小鼠模型的建立

发布时间：2017-05-27 18:11

  本文关键词：C.jejuni在不同条件下的形态学变化及GBS小鼠模型的建立，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：第一部分空肠弯曲菌在不同培养条件下的形态学变化 目的：观察空肠弯曲菌（Campylobacter jejuni,C.jejuni,Cj）在不同培养条件下的形态学变化。 方法：将实验室保存的空肠弯曲菌菌株于不同培养方式、不同培养条件下培养，分时间点进行革兰染色观察其形态变化。 结果：1将状态生长良好的革兰阴性杆菌C.jejuni-Lichang菌株（哥伦比亚血平板培养基）放置在有氧培养条件下，约14小时时开始出现球菌，约30小时几乎全部为球菌；放置在微需氧培养条件下，约24小时时开始出现球菌，约48小时仍可见少量杆菌； 2放入布氏肉汤培养，在微需氧环境下培养，在84小时后仍可见革兰阴性杆菌； 3有氧环境下变化为革兰阴性球菌的C.jejuni-Lichang菌株重新传代放回最适生长的微需氧环境，其形态又可恢复为革兰阴性杆菌。 结论：1空肠弯曲菌从微氧条件下到有氧条件下培养，其形态可从杆状改变为球形，且与持续微需氧条件下培养相比其形态改变时间早； 2C.jejuni-Lichang在有氧环境下培养84小时后，再转入微氧环境下时，细菌仍可继续生长； 3营养条件和供氧状态是影响空肠弯曲菌形态改变的重要因素。 第二部分空肠弯曲菌致GBS小鼠模型的建立 目的：建立空肠弯曲菌（Campylobacter jejuni,Cj）感染C57bl/6小鼠的吉兰-巴雷综合症（Guillain-Barre syndrome,GBS）模型，初步探讨以空肠弯曲菌为感染源引起继发免疫相关疾病的发病模式，为研究GBS的发病机制、其病理生理及空肠弯曲菌的生长特性、感染特性奠定研究模型基础。 方法：1以吉兰-巴雷综合征（Guillain-Barre syndrome,GBS）患者分离培养空肠弯曲菌，经中国疾病预防控制中心鉴定为空肠弯曲菌菌株，并经美国疾病预防控制中心鉴定血清型为PENO19型。用哥伦比亚血琼脂培养基于42℃，5%O2、10%CO_2、85%N_2培养空肠弯曲菌； 2采用3种免疫抗原方式进行造模，即MOG35-55与完全弗氏佐剂混合后腹腔注射（A组）、MOG35-55稀释液与空肠弯曲菌菌液及完全弗氏佐剂混合后皮下多点注射（B组）、MOG35-55与完全弗氏佐剂及空肠弯曲菌菌液灌喂（C组）； 3采用不同浓度的空肠弯曲菌及完全弗氏佐剂混合后皮下多点注射； 4自造模起观察小鼠临床症状，包括肢体活动、肌力、精神状态等并进行神经功能评分； 5取肢体运动障碍的小鼠取其坐骨神经及臂丛神经分支进行HE染色。 结果：1不同免疫方式：A组2只小鼠在免疫后12~13天出现肢体瘫痪等临床症状；B组2只小鼠在免疫后14-15天开始出现软瘫等临床症状；C组免疫5天后，1只小鼠死亡，1只小鼠完全瘫痪，解剖均可见双侧颈部有血凝块，考虑为灌胃损伤，感染致死。2只小鼠于灌胃后5-7天出现精神差，活动减少，13-15天出现肢体瘫痪等临床症状；对照组小鼠则状态良好，，未见明显异常。 2不同浓度：高浓度组在免疫后的11-14天，6只小鼠均出现肢体瘫痪等临床症状；中浓度组免疫后14-17天4只小鼠陆续出现肢体瘫痪临床症状；低浓度组免疫后16天1只小鼠出现肢体瘫痪临床症状；佐剂组6只小鼠均未见肢体无力瘫痪等症状。 3神经病理学检查结果显示轴索萎缩，未见明显神经脱髓鞘改变。初步诊断为急性轴索性神经病。 结论：1空肠弯曲菌感染小鼠后可致急性周围神经病； 2C57BL/6小鼠可作为吉兰巴雷综合征的模型动物。
【关键词】：空肠弯曲菌 形态学 空肠弯曲菌 吉兰巴雷综合征 C57bl/6小鼠 动物模型
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R-332;R745.43
【目录】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-9
• 引言9-10
• 第一部分 空肠弯曲菌不同培养条件下形态学变化10-24
• 前言10
• 材料与方法10-14
• 结果14-16
• 附图16-21
• 讨论21-22
• 小结22-23
• 参考文献23-24
• 第二部分 空肠弯曲菌致 GBS 小鼠模型的建立24-43
• 前言24
• 材料与方法24-31
• 结果31-33
• 附图33-37
• 讨论37-40
• 小结40
• 参考文献40-43
• 结论43-44
• 综述 吉兰巴雷综合症的现代病因理论研究进展44-53
• 参考文献50-53
• 致谢53-54
• 个人简历54

【参考文献】

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1 李春岩;急性运动性轴索型格林—巴利综合征[J];脑与神经疾病杂志;1998年03期

2 彭聿平,邱一华,程纯,戴丽,黄慧伟;不同种系动物诱导实验性变态反应性脑脊髓炎模型的研究[J];南通医学院学报;2000年01期

3 姜海;李春岩;顾一心;刘瑞春;张茂俊;张建中;;吉兰-巴雷综合征相关空肠弯曲菌脂寡糖基因簇序列分析[J];脑与神经疾病杂志;2007年02期

4 郑桂丽,廖绍安,翟俊辉,纪伟尚,杨瑞馥;环境中“活的非可培养(VBNC)”细菌的研究进展[J];微生物学免疫学进展;2004年04期

5 李春岩;田文强;刘瑞春;王桂荣;薛平;杨程;;PEN019空肠弯曲菌的脂多糖致轴索型格林-巴利综合征动物模型研究[J];中华物理医学杂志;1997年01期

  本文关键词：C.jejuni在不同条件下的形态学变化及GBS小鼠模型的建立，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：400794