霍乱弧菌活的非可培养状态的转录组及蛋白组研究

发布时间：2024-12-19 02:03

　　霍乱弧菌是霍乱的病原体,广泛存在于海洋及江河入海口环境中。在恶劣环境中霍乱弧菌会以活的非可培养(Viable but non-culturable state, VBNC)状态维持生存,此时常规分离方法检测不到,在环境条件合适时,VBNC状态的霍乱弧菌会复苏为活跃增殖的可培养状态。因此,VBNC状态是霍乱弧菌的一种应激生存方式,会在霍乱监测中造成漏检。 本研究在实验室条件下对霍乱弧菌这一特殊的状态进行了转录组及蛋白组的分析,探索霍乱弧菌进入此状态过程中的生理学变化。已有研究报道了VBNC状态与常规培养状态的转录组比较,在本研究中,我们在低温和人造海水条件下、对01群El Tor型霍乱弧菌自实验室常规培养状态向VBNC状态发展过程中的连续变化进行了转录组比较。在低温低营养条件下,随着培养的时间延长,霍乱弧菌核糖体RNA (rRNA)的断裂程度也越来越强,在VBNC状态中,rRNA则主要表现为断裂小片段形式,提示细胞的蛋白质合成以及相应的生理活动变弱。对霍乱弧菌进入VBNC过程中各时间点差异转录基因的比较也显示了这一特征,随着培养时间的延长,转录下调及沉默的基因数量增多,提示细菌逐步关闭...

【文章页数】：115 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图1-1平板计数以及活细iMi计数结果

在培养过程中我们用两种方法分别观察霍乱弧菌可培养细菌个数以及细胞膜完整的活细菌数。图1-1中A为平板计数的结果，从结果可以看出随着培养时间的延长可培养细菌数逐渐减少，尤其前20天可培养细菌数急剧下降，到第20天的时候可培养细菌数从108cfu/mlF降到103cfu/ml，20....

图1-2为根据平板计数结果得出的存活率，其中A为对两种方法每隔10天

中国疾病预防控制中心博上学位论文2结果2.1诱导霍乱弧菌进入VBNC状态在实验室条件下将霍乱弧菌置与4°C人造海水中避光培养诱导其进入VBNC状态。在培养过程中我们用两种方法分别观察霍乱弧菌可培养细菌个数以及细胞膜完整的活细菌数。图1-1中A为平板计数的结果，从结果可以看出随着培....

图1-8基因覆盖度分析

图1-8基因覆盖度分析从图中我们可以看到Oh的样本90%?100%覆盖的基因占88%,4h的样本有一个明显下降占71%;24h的样本比4h的好占85%;3day、7d、20d、70d样本90%?100%的覆盖度随着培养时间的延长所占比例越来越低。2.4霍乱弧菌进入VBNC过....

图1-9霍乱弧菌进入VBNC过程中表达基因的统计

基因上我们就认为这个基因是表达的。霍乱弧菌进入VBNC过程中各时间点基因表达的统计见图1-9，70day的样本只有2492个基因处于转录状态远远低于前几个时间点，说明至少有1/3的基因处于沉默状态，另外还有很大一部分基因相对表达量降低，此时细菌进入休眠状态。20d70d图1-9....

本文编号：4017478