大肠杆菌f2噬菌体多克隆抗体的研制及应用

发布时间：2025-01-09 07:06

　　大肠杆菌f2噬菌体是一种RNA病毒,其有些特性与肠道病毒极为相似,能像粪大肠菌群那样在人和动物的肠道中存在,且其在水中的存活时间、对氯消毒的抵抗力也与脊髓灰质炎病毒相近。因此,国内外研究人员认为,大肠杆菌f2噬菌体是一种比较理想的水中肠道病毒污染的指示物,并将它广泛用于饮用水消毒效果评价,污水与环境水体中肠道病毒浓度、存活状况评估,环境监测方法与技术研究等方面。传统的f2噬菌体检测方法有浊度比色、空斑实验等,后者既可定性也可定量,是一种常用的实验方法。但是,它需要培养宿主菌和严格的无菌操作等繁琐过程。寻找更加简单、快捷、经济、可靠的f2噬菌体检测方法,是研究者不懈努力的方向。大量研究资料表明,能够满足上述检测要求的可行方法,有免疫层析、ELISA等免疫学方法。但是到目前为止,针对f2噬菌体相关报道几乎未见。因此,本研究尝试制备兔抗f2噬菌体多克隆抗体,以摸索出一条制备其抗体的方法和途径,为相关的单克隆抗体制备及f2噬菌体的检测研究提供最基础的实验素材。f2噬菌体为不含包膜的病毒颗粒,核衣壳表面含有丰富的抗原决定簇,用它免疫动物,不同的抗原决定簇能刺激不同的淋巴细胞而产生针对不同决定簇的抗...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图2间接ELISA法方阵滴定结果

华中科技大学硕士学位论文表4间接ELISA法方阵滴定结果Table4Detectionresultofcheckerboardtitration二抗稀释倍数浓度包被空白阴性对照1:5001:10001:20001:40001:....

图6光学显微镜下免疫磁珠Fig.6Magneticbeads(A)andimmunomagneticbeads(B)undermicroscope

华中科技大学硕士学位论文结果3.1免疫磁珠的制备光学显微镜下，微(空白)磁珠颗粒分布均匀，很少见到成团现象，在磁场中有着良好的超顺磁性，并能迅速凝集成团(图6A)，而直接观察本实验制备的免疫磁珠可见溶液混浊度增加，光学显微镜下颗粒分布均匀，磁珠体积变大....

图1多竞隆抗体的形成

针对某一种抗原决定族的抗体，在连续免疫时，一种抗原的多种决定族会刺激多个免疫细胞增殖分化，这样就可能分泌多种抗体，像这种有同一抗原不同抗原决定族引发机体产生的不同类型的单一抗体，称为多克隆抗体（见图1）。效价不同的多克隆抗体直接影响到各种应用的效果，要把抗体应用到人体及临床，必须....

本文编号：4025342