玉郎伞黄酮对Aβ42阿尔茨海默病细胞模型和果蝇模型的保护作用研究

发布时间：2017-05-28 13:05

  本文关键词：玉郎伞黄酮对Aβ42阿尔茨海默病细胞模型和果蝇模型的保护作用研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的： 探讨玉郎伞黄酮(YLSF)对阿尔茨海默病(AD)细胞和果蝇模型的保护作用及机制，为其临床开发与应用提供基础理论和科学依据。 方法: 1.应用生物化学的方法研究YLSF对SH-SY5Y细胞中caspase-3活性的影响。 2.应用GAL4/UAS系统构建在神经系统过表达Aβ42的转基因果蝇模型。 3.通过表型观察，研究YLSF对Aβ42转基因果蝇模型爬行能力及寿命的影响。 4.应用生物化学的方法研究YLSF对Aβ42转基因果蝇脑组织SOD活性及MDA含量的影响。 5.应用反向高效液相色谱技术检测YLSF对Aβ42转基因果蝇脑组织ATP水平的影响。 结果： 1. Caspase-3结果显示：与空白对照组比较， Aβ42(10μM)干预组SH-SY5Y细胞中caspase-3活性明显增高。与Aβ42干预组比较，YLSF(0.01mg/ml)与Aβ42(10μM)联合干预组SH-SY5Y细胞caspase-3活性显著下降。与空白对照组比较，，YLSF(0.01mg/ml)干预组SH-SY5Y细胞caspase-3活性无显著性差别。 2.成功应用GAL4/UAS系统构建果蝇神经系统过表达Aβ42的转基因果蝇模型。结果发现，25天成蝇脑组织切片发现神经细胞区域有神经元细胞死亡留下的空洞，而同龄正常对照果蝇则未出现明显的空洞，并通过行为学观察发现其爬行能力降低及寿命缩短。 3.采用适宜剂量YLSF(0.067mg/ml)干预Aβ42转基因果蝇模型后，其爬行能力得到明显的改善。 4.采用适宜剂量YLSF(0.067mg/ml)能延长Aβ42转基因果蝇及正常果蝇的寿命。 5.分光光度计检测结果显示：与正常果蝇比较，Aβ42转基因果蝇SOD活性降低，MDA含量增高；而YLSF干预组，两个指标均未表现出明显的变化。与Aβ42转基因果蝇比较，YLSF干预后的Aβ42转基因果蝇SOD活性增加，MDA含量降低。 6.反向高效液相色谱动态检测果蝇脑组织ATP含量发现：早期各组Aβ42转基因果蝇脑组织ATP水平无明显差异。而中晚期脑组织ATP逐渐显示差异性，其中30、36天成蝇，Aβ42转基因果蝇较正常对照果蝇ATP含量降低，而YLSF干预组较未干预Aβ42转基因果蝇ATP含量明显增高。 结论: 1.体外细胞实验表明，YLSF能够有效抑制Aβ42诱发的SH-SY5Y细胞凋亡。 2.成功构建果蝇神经系统过表达Aβ42转基因果蝇模型的研究表明，其病理特征及表型与AD存在相关性。 3. YLSF干预Aβ42转基因果蝇，其爬行能力得到明显的改善。 4.适宜剂量的YLSF能有效延长Aβ42转基因果蝇及正常果蝇的寿命。 5. SOD活性、MDA检测结果表明：适宜剂量的YLSF能够增强Aβ42转基因果蝇清除自由基的能力及抗脂质过氧化的能力。 6. YLSF能够改善线粒体的功能，增加Aβ42转基因果蝇脑组织线粒体ATP的生成。
【关键词】：阿尔茨海默病 玉郎伞黄酮 Aβ42转基因果蝇 细胞凋亡 氧化应激 ATP
【学位授予单位】：桂林医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R749.16;R-332
【目录】：

• 中文摘要5-8
• ABSTRACT8-11
• 英汉缩略词对照表11-13
• 前言13-17
• 第一部分 玉郎伞黄酮对Aβ42细胞模型caspase-3的影响17-23
• 1 材料与方法17-21
• 2 结果21-22
• 3 讨论22
• 4 结论22-23
• 第二部分 玉郎伞黄酮对 Aβ42 转基因果蝇模型的作用研究23-66
• 第一章 Aβ42 转基因果蝇模型的构建及鉴定25-37
• 1 材料与方法25-33
• 2 结果33-36
• 3 讨论36
• 4 结论36-37
• 第二章 玉郎伞黄酮对 Aβ42 转基因果蝇模型爬行能力的影响37-44
• 1 材料与方法37-41
• 2 结果41-42
• 3 讨论42-43
• 4 结论43-44
• 第三章 玉郎伞黄酮对 Aβ42 转基因果蝇模型寿命的影响44-49
• 1 材料与方法44-47
• 2 结果47-48
• 3 讨论48
• 4 结论48-49
• 第四章 玉郎伞黄酮对 Aβ42 转基因果蝇模型脑组织 SOD 活性、MDA 含量的影响49-56
• 1 材料与方法50-54
• 2 结果54-55
• 3 讨论55
• 4 结论55-56
• 第五章 玉郎伞黄酮对 Aβ42 转基因果蝇模型脑组织 ATP 含量的影响56-66
• 1 材料与方法56-62
• 2 结果62-65
• 3 讨论65
• 4 结论65-66
• 参考文献66-75
• 综述75-88
• 参考文献81-88
• 攻读学位期间发表的学术论文目录88-89
• 致谢89-90
• 附件90

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前5条

1 焦杨,段小群,黄仁彬,韦锦斌,蒋伟哲;玉郎伞提取物对超氧阴离子自由基和羟自由基的抑制和清除作用[J];广西医科大学学报;2004年01期

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3 黄仁彬;林兴;蒋伟哲;焦杨;李江;张士军;;玉郎伞化学成分对自发性高血压大鼠血压的影响[J];中国医院药学杂志;2006年02期

4 黄忠仕,林兴,李江,张士军,焦杨,黄仁彬;龙眼参多糖对D-半乳糖所致的痴呆小鼠脑组织NO、SOD、MDA的影响[J];中国老年学杂志;2005年02期

5 陈健;林兴;焦杨;王乃平;黄仁彬;;玉郎伞多糖对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制初探[J];中国新药杂志;2008年13期

  本文关键词：玉郎伞黄酮对Aβ42阿尔茨海默病细胞模型和果蝇模型的保护作用研究，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：402677