甘露聚糖肽对细胞因子诱导的杀伤细胞的活性的影响

发布时间：2017-05-29 19:01

  本文关键词：甘露聚糖肽对细胞因子诱导的杀伤细胞的活性的影响，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的甘露聚糖肽(?)nannatide)是一种生物反应修饰物,是从健康人口腔分离的α-溶血性链球菌(a-hemolytic Streptococcui)33号菌株经深层培养,发酵提取而得到的一种多糖肽类物质,兼具较强的的免疫活性及抗肿瘤作用的双重生物学特性。细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine induced killer cells, CIK)是利用人外周血单个核细胞在体外用多种细胞因子如重组人白介素2(IL-2)、重组人Y干扰素(IFN-γ)和抗人CD3单克隆抗体(anti-CD3mab)等诱导而获得的一群异质细胞。其主要的效应细胞为CD3+CD56+细胞,CIK是一种新型、高效、兼具有T淋巴细胞强大的抗瘤活性和NK细胞的非MHC限制性杀瘤特点的免疫效应细胞,在肿瘤过继性免疫治疗中显露出巨大的应用价值。目前有关甘露聚糖肽能否增强CIK的增殖及杀伤活性研究报道较少,本研究通过观察甘露聚糖肽作用后CIK的增殖及对于K562、Raji细胞株的杀伤活性的变化,初步探讨甘露聚糖肽对人CIK的杀伤活性的影响并探讨相应机制,为甘露聚糖肽应用于过继性免疫治疗提供实验和理论依据。 方法抽取健康供血者外周血,分离单个核细胞(PBMC),常规制备CIK细胞,收集培养14d的CIK细胞加入不同浓度的甘露聚糖肽培养48h作为实验组,对照组不添加甘露聚糖肽。用倒置显微镜观察实验组及对照组CIK细胞形态学变化；MTT法检测细胞增殖率；FCM法检测免疫表型及CD3+CD56+细胞表达以及CIK细胞表面NKG2D含量,FCM法检测CIK细胞颗粒酶与穿孔素的表达；LDH释放法测定CIK细胞对于K562、Raji细胞株杀伤活性。 结果各实验组的甘露聚糖肽均可促进CIK细胞增殖,并呈浓度依赖性；并可上调CIK细胞表面NKG2D受体表达(P0.05)；其分泌颗粒酶、穿孔素的能力亦显著高于对照组(P0.05)；经甘露聚糖肽作用的CIK细胞对于K562、Raji细胞株的杀伤活性明显升高(P0.05)。 结论甘露聚糖肽有望作为CIK免疫活性的增强佐剂,但应进一步研究其确切机制。
【关键词】：CIK细胞 甘露聚糖类 杀伤活性
【学位授予单位】：兰州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R392
【目录】：

• 中文摘要3-4
• Abstract4-8
• 前言8-10
• 材料与方法10-15
• 1.1 试剂与仪器10-11
• 1.2 主要溶液配置及细胞株培养11
• 1.3 CIK细胞的制备11-12
• 1.4 CIK细胞的免疫表型及NKG2D受体检测12
• 1.5 甘露聚糖肽作用于CIK细胞12
• 1.6 甘露聚糖肽作用前后CIK细胞形态学观察12-13
• 1.7 甘露聚糖肽作用后CIK细胞免疫表型及NKG2D受体检测13
• 1.8 MTT法检测不同浓度的甘露聚糖肽对CIK细胞增殖的影响13
• 1.9 FCM检测甘露聚糖肽作用前后CIK细胞穿孔素、颗粒酶B的表达13-14
• 1.10 LDH法测定甘露聚糖肽作用后CIK细胞的杀伤活性14-15
• 结果15-21
• 2.1 甘露聚糖肽促进CIK细胞增殖15-17
• 2.2 甘露聚糖肽对CIK细胞免疫表型及NKG2D表达的影响17-18
• 2.3 甘露聚糖肽对CIK细胞增殖率的影响18-19
• 2.4 甘露聚糖肽对CIK细胞穿孔素、颗粒酶B的表达影响19
• 2.5 甘露聚糖肽作用于CIK细胞后其对于Raji、K562细胞的杀伤活性的检测19-21
• 讨论21-26
• 结论26-27
• 参考文献27-29
• 综述29-37
• 参考文献34-37
• 在学期间的研究成果37-38
• 致谢38-39
• 英文缩略词39

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 王义平;张彩;牛家峰;张建华;许晓群;王郡甫;;NKG2D配体在13种肿瘤细胞系中的表达及意义[J];癌症;2008年03期

2 单延红;张海军;徐志刚;崔满华;;姜黄素联合人类细胞因子诱导的杀伤细胞对卵巢癌细胞增殖的抑制作用及其机制[J];吉林大学学报(医学版);2011年02期

3 童春容,耿彦彪,陆道培;自体细胞因子诱导的杀伤细胞治疗急性白血病的临床研究[J];北京医科大学学报;2000年05期

4 成月英;郭彦聪;张敬国;;甘露聚糖肽调节免疫功能的研究近况[J];中国医药导刊;2008年05期

5 王忠成;王钰;;抗原负载的DC与DC-CIK抗肿瘤作用的比较分析[J];解剖科学进展;2011年04期

6 杨葳;沈志奇;王俊懿;王大鹏;罗社文;高锦;徐铭宝;;我国新型肿瘤细胞治疗方法CIK的研究与应用现状[J];科技导报;2008年06期

7 赵连梅;潘晓明;宋华琴;单保恩;;淫羊藿苷增强CIK细胞对B-MD-C1(ADR~(+/+))细胞杀伤敏感性的实验研究[J];免疫学杂志;2011年02期

8 张军,蒋平娟,甘京洲,乐芹;多抗甲素片治疗儿童反复呼吸道感染40例[J];四川医学;2001年03期

9 李建旺;彭大为;黄春珍;元建华;;自体CIK细胞及DC细胞联合索拉非尼治疗晚期肝癌的临床观察[J];实用癌症杂志;2011年05期

10 高珊,王继营,崔黎,黄丽春,朱玉昆,宋立友;晚期肺癌放化疗前后免疫功能改变的近期临床观察[J];实用肿瘤学杂志;1999年02期

  本文关键词：甘露聚糖肽对细胞因子诱导的杀伤细胞的活性的影响，由笔耕文化传播整理发布。

，

本文编号：405460