利用TALEN技术高效制备TXNIP基因敲除小鼠模型

发布时间：2017-05-30 15:08

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【摘要】：目的利用显微注射技术注射敲除Txnip基因的TALEN mRNA获得TXNIP敲除小鼠。方法在线设计Txnip敲除位点,构建TALEN载体并在细胞水平验证剪切活性,体外转录TALENs成mRNA并通过显微注射技术注射到C57BL/6J小鼠受精卵,对F0代小鼠进行DNA水平鉴定获得TXNIP敲除小鼠。结果在Txnip第一外显子上设计了TALEN识别剪切位点,并在细胞水平验证具有剪切活性,注射mRNA到受精卵获得了4只敲除小鼠,其中2只Txnip发生移码突变,成功制备了TXNIP敲除小鼠。结论通过注射TALENs mRNA可以高效制备TXNIP敲除小鼠。
【作者单位】： 浙江省医学科学院浙江省实验动物中心;深圳华大基因研究院;
【关键词】： TALEN 显微注射 TXNIP 基因敲除 模型 小鼠
【基金】：浙江省卫生高层次创新人才项目 浙江省科技厅院所专项(2014F10033)
【分类号】：R-332
【正文快照】： 。基因敲除小鼠模型是研究基因功能的重要工具之一,最早科学家利用同源重组技术制备基因敲除小鼠ES细胞系,然后通过囊胚注射制备基因敲除小鼠[1,2],近年来兴起的基因组编辑工具,例如锌指核酸酶ZFN[3],转录激活因子样效应物核酸酶TALEN[4],规律成簇间隔短回文重复序列CRISPR以

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本文编号：407372