电荷对流感疫苗脂质体免疫原性的影响

发布时间：2017-05-31 13:03

  本文关键词：电荷对流感疫苗脂质体免疫原性的影响，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：为获得稳定、高效的流感疫苗,本论文在中性脂质体作为佐剂的基础上,为提高流感疫苗免疫原性,现进行阳离子脂质体作为疫苗佐剂的研究。 本研究分为四章,第一章为前言对流感疫苗脂质体做了系统的概述；第二章为流感疫苗脂质体冻干粉的制备及其理化性质：主要以大豆卵磷脂、胆固醇和胆固醇盐酸盐(DCCHOL)为原料,采用薄膜分散-冻干法制备流感病毒疫苗脂质体干粉,可制得中性脂质体干粉和阳离子脂质体干粉,对制得的两种流感疫苗脂质体干粉的粒径,包封率情况进行了全面的考察；第三章为电荷对流感疫苗脂质体免疫原性的影响的动物免疫实验：进一步用制得的中性脂质体干粉和阳离子脂质体干粉两种流感疫苗脂质体干粉对昆明种小鼠进行呼吸道免疫。以流感病毒裂解疫苗(H1N1)作为免疫原,利用间接ELISA法测定免疫小鼠血清抗体水平,从而进一步考察薄膜分散-冻干法制得的两种流感疫苗脂质体干粉的免疫原性；第四章为脂质体作为疫苗佐剂的研究进展(综述)。 实验结果表明薄膜分散法制得的阳离子脂质体平均粒径2.78μm中,薄膜分散法制得的中性脂质体平均粒径3.02μm,其中阳离子脂质体的平均粒径较中性脂质体的平均粒径更趋于均匀化,薄膜分散冻干法制得的阳离子流感疫苗脂质体平其中1.0-7.0μm粒径占94.9%,包封率为81.67%。免疫产生的血清IgG水平,腹腔免疫2%DC-Chol (3β-[N-(N',N'-二甲基胺乙烷)-胺基甲酰基]胆固醇盐酸盐)liposome阳离子脂质体实验组整体而言高于liposome中性脂质体组。肺部免疫阳离子脂质体实验组1%DC-Chol liposome在低剂量给药状态下高于中性脂质体组liposome;肺部免疫阳离子脂质体实验组(1%,2%,4%)DC-Chol liposome高剂量给药状态下产生抗体水平明显优于中性脂质体组liposome。阳离子脂质体优于中性脂质体,说明阳离子脂质体的免疫原性优于中性脂质体。
【关键词】：流感疫苗 阳离子脂质体 包封率 肺部给药 免疫原性
【学位授予单位】：昆明医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R392
【目录】：

• 摘要4-6
• Abstract6-10
• 第一章 前言10-20
• 1. 流感概述10-13
• 1.1 流感病毒10-12
• 1.2 流感病毒抗原变异12
• 1.3 抗病毒药物12-13
• 2. 流感疫苗13-14
• 2.1 流感病毒灭活疫苗13-14
• 2.2 流感病毒减毒活疫苗14
• 2.3 其它疫苗14
• 3. 疫苗佐剂14-19
• 3.1 脂质体佐剂功能15-16
• 3.2 DC-ChoI阳离子脂质体疫苗佐剂16-17
• 3.3 流感疫苗脂质体呼吸道免疫特点17-18
• 3.4 脂质体肺部给药的安全性18
• 3.5 脂质体佐剂存在的问题18-19
• 4. 本课题设计19-20
• 第二章 流感疫苗阳离子脂质体冻干粉的制备及其理化性质20-37
• 1. 材料20-21
• 1.1 流感疫苗20
• 1.2 实验试剂20
• 1.3 实验动物20
• 1.4 实验仪器20-21
• 2. 流感疫苗脂质体制备21-27
• 2.1 薄膜分散法制备流感疫苗中性脂质体21-23
• 2.2 薄膜分散法制备流感疫苗阳离子脂质体23-27
• 3. 两种流感疫苗脂质体形态观察和粒径分布测定27-29
• 3.1 形态学观察27
• 3.2 流感疫苗脂质体包封率的测定27-29
• 4. 结果29-33
• 4.1 两种流感疫苗脂质体形态及粒度分布测定结果29-32
• 4.2 流感疫苗脂质体包封率测定结果32-33
• 5. 讨论33-35
• 5.1 薄膜分散-冻干法33-34
• 5.2 冷冻干燥技术34
• 5.3 磷脂二次成膜法34-35
• 5.4 包封率测定方法选择35
• 6. 小结35-37
• 第三章 动物免疫实验--电荷对流感疫苗脂质体免疫原性的影响37-50
• 1. 材料38-39
• 1.1 流感疫苗38
• 1.2 试剂38-39
• 1.3 实验动物39
• 1.4 实验仪器39
• 2. 方法39-44
• 2.1 动物分组39-40
• 2.2 肺部免疫方法40
• 2.3 血清制备40-41
• 2.4 间接ELISA法测定抗体水平实验41-44
• 2.4.1 ELISA试剂的配制41-42
• 2.4.2 间接ELISA法检测血清IgG42-44
• 2.4.3 方阵ELISA(棋盘滴定)确定最佳工作浓度44
• 3. 结果44-47
• 3.1 间接ELISA法最佳工作浓度44-45
• 3.2 免疫抗体水平测定结果45-47
• 4. 讨论47-49
• 4.1 间接ELISA法的影响因素47-48
• 4.1.1 样品的采集47
• 4.1.2 包被的抗原47
• 4.1.3 非特异性吸附47-48
• 4.1.4 ELISA的显色系统48
• 4.2 呼吸道免疫48-49
• 5. 小结49-50
• 参考文献50-56
• 第四章 脂质体作为疫苗佐剂的研究进展(综述)56-64
• 参考文献61-64
• 附录64-67
• 攻读学位期间发表文章情况67-68
• 致谢68

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

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本文编号：409520