Ghrelin通过JNK信号通路抑制LPS诱导的肺泡巨噬细胞凋亡
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【摘要】:【目的】观察体外条件下加入外源性ghrelin对内毒素(LPS)诱导大鼠肺泡巨噬细胞NR8383凋亡以及吞噬能力的影响,并探讨JNK(c-Jun N-terminal kinase)信号通路在其中所起的作用。【方法】用CCK-8(Cell Counting Kit-8)法检测加入LPS或者ghrelin与LPS共孵育后NR8383的细胞毒性;流式细胞技术、原位末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡率;Western blot检测JNK、phospho-JNK信号通路蛋白以及cleaved caspase-3、Bax、Bcl-2凋亡相关分子蛋白的表达;激光共聚焦技术检测巨噬细胞的吞噬能力;使用ghrelin受体拮抗剂[D-Lys-3]-GHRP-6、JNK特异性抑制剂SP600125分别抑制ghrelin受体及JNK激酶的激活。【结果】CCK-8检测结果显示LPS可显著抑制NR8383增殖,而ghrelin可呈浓度依赖性地阻断这种抑制作用;流式和TUNEL检测进一步证实ghrelin可显著降低LPS所致NR8383凋亡作用(P0.05),而应用ghrelin受体拮抗剂[D-Lys-3]-GHRP-6可以减弱ghrelin的抗凋亡效果(P0.05);LPS可以激活JNK激酶活性,并改变其下游凋亡相关蛋白的表达,其中促凋亡蛋白Bax以及cleaved caspase-3表达上调,抗凋亡蛋白Bcl-2表达下调,应用ghrelin可以逆转LPS对JNK激酶的激活,继而下调Bax以及cleaved caspase-3的表达,上调Bcl-2的表达,差异均具有统计学意义(P0.05);ghrelin还可以维持LPS持续刺激下NR8383的吞噬能力(P0.05)。【结论】ghrelin通过下调JNK信号通路的激活抑制LPS诱导的NR8383的凋亡,并维持其吞噬能力。
【作者单位】: 中山大学附属第一医院MICU;
【关键词】: ghrelin 凋亡 内毒素 肺泡巨噬细胞 c-Jun N-terminal kinase(JNK)
【基金】:广东省自然科学基金(S2013010015025) 广州市科技计划项目(2014Y2-00136)
【分类号】:R3416
【正文快照】: ghrelin是一种含有28个氨基酸残基的生长激素释放肽(growth hormone releasing peptide),是生长激素促泌素受体(growth hormone scretagoguereceptor,GHS-R)的内源性配体,主要在胃组织内合成,并释放入血循环作用于全身[1]。ghrelin和它的受体GHS-R广泛表达于多种组织,其中就包
【参考文献】
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【共引文献】
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,本文编号:424884
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