串珠素对成纤维细胞增殖的影响及其与碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的关系
本文关键词:串珠素对成纤维细胞增殖的影响及其与碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的关系,由笔耕文化传播整理发布。
【摘要】:目的观察串珠素对成纤维细胞增殖的影响及其与bFGF关系的研究。 方法大鼠L4-5椎板切除模型的建立,于术后4周取瘢痕结缔组织,行原代及传代培养,将大鼠成纤维细胞随机分为未转染组,转染对照组(MOI=10)和转染组(MOI=10),通过荧光定量PCR法检测串珠素mRNA的表达,利用western blotting技术测定串珠素及bFGF的蛋白表达变化,最后使用MTT法检测细胞增殖状况及加入BFGF后细胞增殖状况的变化。 结果将慢病毒Lv-shPerlecan成功地转入大鼠成纤维细胞,串珠素mRNA和蛋白质水平及bFGF在转染组中低表达,在未转染组和转染对照组中高表达,差异均有统计学意义(P<0.05)。在含0.1%FBS的RPMI-1640培养基培养下,未转染组、转染对照组和转染组细胞的增殖率均降低,但转染组细胞的增殖与未转染组和转染对照组细胞相比减低更明显。而使用加入0.1%FBS和lμg/L bFGF的培养液培养,未转染组和转染对照组的成纤维细胞增殖接近正常,但转染组的细胞增殖能力仍然较弱。 结论慢病毒Lv-shPerlecan转染大鼠成纤维细胞后串珠素表达下调,细胞增殖率下降,同时bFGF表达的量减少,转染组的大鼠成纤维细胞对bFGF的反应性降低。
【关键词】:成纤维细胞 串珠素 慢病毒 转染 碱性成纤维细胞生长因子
【学位授予单位】:青岛大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2013
【分类号】:R329
【目录】:
- 摘要2-3
- Abstract3-4
- 目录4-5
- 引言5-6
- 第1章 实验试剂与方法6-13
- 1.1 实验试剂6
- 1.2 实验分组与方法6-12
- 1.3 统计学方法12-13
- 第2章 结果13-16
- 2.1 PCR结果13
- 2.2 Western Blot结果13-14
- 2.3 MTT结果14-16
- 第3章 讨论16-18
- 3.1 预防术后瘢痕的必要性16
- 3.2 bFGF与串珠素在瘢痕形成的重要性16
- 3.3 慢病毒转导基因的优越性16-18
- 第4章 结论18-19
- 参考文献19-21
- 综述21-34
- 参考文献29-34
- 攻读学位期间的研究成果34-35
- 致谢35-36
【参考文献】
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本文编号:427957
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