体外培养小鼠微量圆形精子细胞冷冻保存研究

发布时间：2017-06-27 11:20

  本文关键词：体外培养小鼠微量圆形精子细胞冷冻保存研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：第一部分体外培养小鼠微量圆形精子细胞冷冻保存方法研究 目的：探讨体外培养微量小鼠圆形精子细胞的最佳冷冻方法和冷冻条件。方法：采用玻璃化冷冻和常规慢冷冻分别在不同浓度甘油（5%、7%、11%）及不同平衡时间（0、15、30、45、60min）条件下对体外培养所获微量小鼠圆形精子细胞进行冷冻保存。结果：（1）玻璃化冷冻和常规慢冷冻在7%甘油中平衡时间30min均可获得最佳复苏率；（2）在最佳冷冻条件下，玻璃化冷冻小鼠圆形精子细胞的复苏率显著高于常规慢冷冻方法（P＜0.05）。结论：采用玻璃化冷冻方法，，在7%浓度的甘油保护剂中平衡30min行微量小鼠圆形精子细胞冷冻，可获得较满意的细胞复苏率。 第二部分冻融体外培养小鼠圆形精子细胞在体外受精中的应用价值 目的：探讨冻融体外培养小鼠圆形精子细胞在体外受精中的应用价值。方法：对玻璃化冷冻复苏的体外培养小鼠圆形精子细胞标记DAPI荧光染料，行小鼠卵泡浆内显微注射（ROSI）后观察其受精和胚胎发育过程。结果：解冻后精子细胞DAPI标记率为100%， ROSI后双原核期雄原核的DAPI标记率为80.0%，第一次卵裂的2细胞期标记率为77.3%；受精率、2-细胞率、4-8细胞率、桑囊胚率分别为51.9%、51.0%、41.8%和12.2%。结论：冻融小鼠圆形精子细胞具有一定的受精能力和胚胎发育潜能。
【关键词】：生精细胞 圆形精子 玻璃化冷冻 甘油 ROSI DAPI
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R321.1;R318.52
【目录】：

• 英文缩略词表6-7
• 中文摘要7-8
• Abstract8-10
• 引言10-12
• 第一部分12-22
• 1 材料13-15
• 2 方法15-16
• 3 统计学分析16-17
• 4 结果17-18
• 5 讨论18-21
• 6 结论21-22
• 第二部分22-31
• 1 材料22-24
• 2 方法24-27
• 3 结果27-28
• 4 讨论28-30
• 5 结论30-31
• 参考文献31-35
• 附录35-36
• 致谢36-38
• 综述38-45
• 参考文献43-45

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前3条

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3 张永忠,谭景和;哺乳动物生精细胞显微授精研究与展望[J];自然杂志;2001年02期

中国博士学位论文全文数据库 前2条

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中国硕士学位论文全文数据库 前5条

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  本文关键词：体外培养小鼠微量圆形精子细胞冷冻保存研究，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：489627