再程序化星形胶质细胞的制备及体外定向分化为神经元的研究

发布时间：2017-09-07 01:43

  本文关键词：再程序化星形胶质细胞的制备及体外定向分化为神经元的研究

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【摘要】：目的探讨再程序化星形胶质细胞制备并在体外诱导其分化为神经元。方法在体外培养大鼠脑皮质来源星形胶质细胞(astrocyte),随后将提纯、鉴定过的第三代星形胶质细胞接种于12孔培养皿中,并分为A、B、C 3组。其中A组为带有绿色荧光蛋白(GFP)的慢病毒载体介导neurogenin2(Ngn2)基因转染的星形胶质细胞,制备再程序化星形胶质细胞;B组为带有GFP基因的空载体病毒转染的星形胶质细胞;C组为未进行慢病毒介导基因转染的星形胶质细胞;转基因1周后加入含细胞生长因子诱导培养基诱导分化15 d,光镜下观察各组细胞形态变化以及定向神经元分化的差异。结果 A组星形胶质细胞转基因后再诱导15 d,很大部分细胞形态呈神经元样改变,胞体呈梭形或椭圆形,有多个突起伸出且突起较长,表达神经元核蛋白(Neu N)、神经丝蛋白(NF)及神经元特异性烯醇化酶(NSE)的比例大大提高,相比B组及C组,差异有统计学意义(均P0.05);而B组与C组神经元分化比例的差异无统计学意义(P0.05)。结论慢病毒介导Ngn2基因体外转染星形胶质细胞可制备出再程序化星形胶质细胞,诱导后具有更强的向神经元定向分化能力。
【作者单位】： 江苏大学附属金坛医院神经外科;南京医科大学第一附属医院神经外科;
【关键词】： neurogenin 星形胶质细胞 神经元分化 再程序化
【基金】：国家自然科学基金(81171147) 江苏省“兴卫工程”医学重点人才基金RC201156 金坛市科技计划项目(JT2014059)
【分类号】：R329.2
【正文快照】： 神经系统损伤可导致机体功能不同程度的缺失,影响个体生活、自理能力。如何修复损伤的神经系统一直困扰着广大科学工作者,至今尚未找到行之有效的治疗手段;通过干细胞诱导分化成神经元来替代受损的神经元将是一种比较可行的治疗手段[1]。以前的种子细胞(如来源于胚胎、骨髓、

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