丹参素对小鼠肾脏缺血再灌注损伤的作用和作用机制的研究

发布时间：2017-09-07 02:03

  本文关键词：丹参素对小鼠肾脏缺血再灌注损伤的作用和作用机制的研究

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【摘要】：第一部分：建立肾脏缺血再灌注损伤小鼠模型 目的：成功建立肾脏缺血再灌注损伤小鼠模型，为后续实验提供支持。 方法：BALB／c小鼠，6-8周龄，20-25g，雄性，30只，随机选择24只作为肾缺血再灌注损伤模型组，术后观察生存率，测血肌酐，切取肾脏进行HE染色；其余6只作为对照组只开腹、分离肾蒂，，切除右侧肾脏，不做其他任何处理，术后测血肌酐，切取肾脏进行HE染色。 结果：模型组术后生存率达91.67%，与对照组比较肌酐的值明显升高，肾脏出现典型病理损伤。 结论：小鼠肾脏缺血再灌注损伤模型建立成功，术后生存率较高，肾功能明显受损，肾脏出现典型病理损伤，符合实验要求。 第二部分：在小鼠肾脏缺血再灌注损伤中丹参素作用的研究 目的:明确丹参素在小鼠肾脏缺血再灌注损伤中的作用。 方法：BALB／c小鼠，6-8周龄，20-25g，雄性，20只，随机分为sham组、IRI组、IRI-15mg组、IRI-30mg组、IRI-60mg组. IRI组、IRI-15mg组、IRI-30mg组、IRI-60mg组根据第一部分手术方式建立缺血再灌注损伤模型，其中IRI-15mg组、IRI-30mg组、IRI-60mg组使用不同剂量丹参素进行干预，术后采集血清和肾脏等标本，肾组织标本通过HE染色观察肾脏组织形态学变化；检测血清标本肌酐、尿素氮的值。 结果： IRI-30mg组（113.95+2.91、48.44+1.81）、IRI-60mg组（86.12+3.13、40.63+3.49）的肌酐、尿素氮水平均低于IRI组（169.54+5.15、71.48+4.92），结果有统计学意义（P0.001、P0.001；P0.001、P0.001）；IRI-15mg组、IRI-30mg组、IRI-60mg组之间进行比较，差异均有统计学意义（P0.001、P0.01；P0.001、P0.01）；IRI-15mg组、IRI-30mg组、IRI-60mg组的病理损伤程度依次减轻。 结论：丹参素能够减轻小鼠肾脏缺血再灌注损伤。 第三部分：在小鼠肾脏缺血再灌注损伤中丹参素作用机制的研究 目的：阐明在小鼠肾脏缺血再灌注损伤中丹参素的作用机制。 方法：通过RT-PCR检测IL-1β、IL-6、TNF-α的表达；通过化学比色法检测髓过氧化物酶水平；通过考马斯亮兰法检测肾组织标本蛋白浓度；通过黄嘌呤氧化酶法检测抗氧化酶——超氧化物歧化酶的水平；通过TBA法检测丙二醛含量。 结果： IRI组的MPO活力（17.39+0.58）、IL-1β(2.35+0.06)、IL-6(2.38+0.06)、TNF-α(2.53+0.041)等代表炎症水平的指标明显高于sham组(11.44+0.54、0.97+0.08、1.03+0.05、0.99+0.06)，差异均有统计学意义（P0.05、P0.001、P0.001、P0.001）；IRI组的SOD活力（120.57+2.94）显著低于sham组（156.08+9.06），而IRI组的MDA含量（17.29+0.65）显著高于sham组（11.11+0.71），差异均有统计学意义（P0.05、 P0.001、P0.001、P0.001）.丹参素处理的IRI-60mg组（13.53+0.94）、IRI-30mg组（14.98+0.69）分别与IRI组（17.39+0.58）比较，MPO水平均显著低于IRI组，均有统计学差异（P0.05、P0.05），IRI-15mg组（16.44+0.63）MPO活力与IRI组（17.39+0.58）比较差异无统计学意义（P0.05）；丹参素剂量组之间进行比较，MPO水平：IRI-60mg组IRI-30mg组IRI-15mg组，差异均有统计学意义（P0.05）；IRI-60mg组与sham组比较，MPO活力高于sham组（11.44+0.54），差异有统计学意义（P0.05）.丹参素处理的IRI-60mg组（1.46+0.05、1.45+0.06、1.50+0.05）、IRI-30mg组（1.80+0.07、1.82+0.08、1.79+0.05）、IRI-15mg组（2.09+0.13、2.25+0.06、2.19+0.14）分别与IRI组（2.35+0.06、2.38+0.06、2.53+0.041）比较，IL-1β、IL-6、TNF-α的结果差异均有统计学意义（P0.05）；丹参素剂量组之间进行比较，IL-1β、IL-6、TNF-α表达：IRI-60mg组IRI-30mg组IRI-15mg组，差异均有统计学意义（P0.05）；IRI-60mg组与sham组比较，IL-1β、IL-6、TNF-α水平高于sham组（0.97+0.08、1.03+0.05、0.99+0.06），差异均有统计学意义（P0.001、P0.001、P0.001）.丹参素处理的IRI-60mg组（137.38+2.85）、IRI-30mg组（131.08+3.96）分别与IRI组（120.57+2.94）比较，SOD活力差异均有统计学意义（P0.05、P0.05），MDA含量（13.93+0.78、15.43+0.58）均低于IRI组（17.29+0.65），差异均有统计学意义（P0.05、P0.05），IRI-15mg组SOD活力（124.42+2.76）、MDA含量（16.58+0.65）与IRI组比较均无统计学差异（P0.05、P0.05）；丹参素剂量组之间进行比较，SOD水平: IRI-60mg组IRI-30mg组IRI-15mg组，差异均有统计学意义（P0.05、P0.05、P0.05），MDA含量:IRI-60mg组IRI-30mg组IRI-15mg组，差异均有统计学意义（P0.05、 P0.05、P0.05）；IRI-60mg组与sham组比较， SOD活力低于sham组（156.08+9.06），结果有统计学意义（P0.05），MDA含量高于sham组（11.11+0.71），结果有统计学意义（P0.05）. 结论：丹参素减轻小鼠肾脏缺血再灌注损伤的机制是抗炎、抗氧化。
【关键词】：丹参素 缺血再灌注损伤 抗炎 抗氧化
【学位授予单位】：中国人民解放军医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R277.5;R-332
【目录】：

• 英文缩略语6-7
• 中文摘要7-10
• Abstract10-14
• 前言14-15
• 第一部分：建立肾脏缺血再灌注损伤小鼠模型15-21
• 1.实验动物和实验试剂、器械、仪器15-16
• 1.1 实验动物15
• 1.2 实验试剂及主要器械、仪器15-16
• 2.实验方法16-19
• 2.1 实验分组16
• 2.2 手术方式16-17
• 2.3 术后处理17-18
• 2.4 标本处理18
• 2.5 肾功能检测18
• 2.6 HE 染色18-19
• 3.统计学分析19
• 4.结果19-21
• 5.讨论21
• 第二部分：在小鼠肾脏缺血再灌注损伤中丹参素作用的研究21-32
• 1.实验动物及实验试剂、仪器22-23
• 1.1 实验动物22
• 1.2 实验试剂和实验仪器22-23
• 2.实验方法23-26
• 2.1 实验分组23
• 2.2 丹参素溶液的配制23
• 2.3 给药方式23-24
• 2.4 手术方式24
• 2.5 术后处理24-25
• 2.6 标本处理25
• 2.7 肾功能检测25
• 2.8 HE 染色25-26
• 3.统计学分析26
• 4.结果26-30
• 4.1 肾功能指标26-28
• 4.2 组织形态学变化28-30
• 5.讨论30-32
• 第三部分：在小鼠肾脏缺血再灌注损伤中丹参素作用机制的研究32-51
• 1. 实验动物和实验试剂、仪器32-34
• 1.1 实验动物32
• 1.2 实验试剂及实验仪器32-34
• 2.实验方法34-40
• 2.1 RT-PCR 检测炎症因子表达34-36
• 2.2 检测髓过氧化物酶水平（化学比色法）36-37
• 2.3 检测肾组织标本蛋白浓度（考马斯亮兰法）37-38
• 2.4 检测超氧化物歧化酶水平（黄嘌呤氧化酶法）38-39
• 2.5 检测丙二醛水平（TBA 法）39-40
• 3.统计学分析40-41
• 4.结果41-46
• 4.1 IL 1β、IL 6、TNF α、ICAM 1 的表达41-43
• 4.2 MPO 的结果43-44
• 4.3 肾组织蛋白浓度的结果44-45
• 4.4 SOD 的结果45
• 4.5 MDA 的结果45-46
• 5.讨论46-51
• 参考文献51-55
• 文献综述55-64
• 参考文献60-64
• 攻读硕士学位期间发表文章64-65
• 致谢65-66

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前9条

1 吴宗辉;戴立里;余斌斌;李冬;;丹参素对IL-1β刺激的大鼠肝星状细胞JNK、NF-κB信号通道的影响[J];南方医科大学学报;2009年05期

2 郭自强;王硕仁;朱陵群;牛福玲;吴e

本文编号：806752