Edu标记SD大鼠骨髓间充质干细胞的实验研究

发布时间：2017-09-07 05:34

  本文关键词：Edu标记SD大鼠骨髓间充质干细胞的实验研究

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【摘要】：目的：使用不同浓度的Edu标记SD大鼠骨髓间充质干细胞,探讨Edu标记骨髓间充质干细胞的最佳浓度及时间组合。方法：(1)采用全骨髓贴壁法分离纯化骨髓间充质干细胞,观察细胞形态,流式细胞仪检测细胞周期和表面标记物,成骨成脂分化诱导鉴定。(2)分别采用0,10,20,50umol/L浓度的Edu及12,24,48,72h等不同时间标记骨髓间充质干细胞,流式细胞仪测定标记率。检测各浓度、各时间点Edu标记细胞的阳性率,观察标记后细胞形态,并绘制标记细胞的生长曲线以及进行细胞标记后细胞活性检测,增殖及诱导分化实验,并筛选最优的标记浓度组合。结果：(1)骨髓间充质干细胞的鉴定：形态学特征：接种24-48h后,出现贴壁细胞,多为圆形、短梭型、多角形,传至第三代时细胞形态均一,呈单层贴壁生长,细胞多为长梭形,呈旋涡状排列；流式细胞检测其表面标记物CD90、CD29、CD45和CD11b表达分别为94.3%、99.4%、3.2%、5.7%；经成脂诱导剂诱导14天后油红O染色,倒置显微镜下观察可见橘红色脂滴,经成骨诱导剂诱导21天后茜素红染色,镜下可见橘红色钙结节,碱性磷酸酶染色,镜下可见蓝紫色钙结节形成。(2)各浓度组标记率随标记时间延长而升高(P0.05)；各时间点标记率随标记浓度的升高而增加,但其差异无统计学意义(P0.05)。通过各实验,得出最适浓度组合10umoI/L,48h。结论：Edu标记骨髓间充质干细胞简单有效,体外标记SD大鼠骨髓间充质干细胞的最佳组合是10umol/L,48h。对进一步研究骨髓间充质干细胞移植在组织工程作用有一定的实际意义。
【关键词】：5-乙炔基-2'脱氧尿嘧啶核苷 骨髓间充质干细胞 细胞标记
【学位授予单位】：新疆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R329
【目录】：

• 中英文缩略词对照表5-7
• 摘要7-8
• Abstract8-10
• 前言10-13
• 材料与方法13-25
• 结果25-35
• 讨论35-42
• 小结42-43
• 致谢43-44
• 参考文献44-48
• 综述48-56
• 参考文献53-56
• 攻读硕士期间发表的学位论文56-57
• 导师评阅表57

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 朱伟民;王大平;熊建义;;骨组织工程支架材料的生物学特性及临床应用[J];中国组织工程研究与临床康复;2007年48期

2 彭伟;刘郑荣;;骨髓间充质干细胞在IgA肾病大鼠肾脏中的定位与分布[J];中国组织工程研究与临床康复;2011年23期

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本文编号：807707