小脑颗粒神经元细胞凋亡中caspase-8基因变化与二乙酰吗啡的影响

发布时间：2017-09-07 05:29

  本文关键词：小脑颗粒神经元细胞凋亡中caspase-8基因变化与二乙酰吗啡的影响

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【摘要】：背景:半胱-天冬氨酸蛋白酶8(Caspase-8)是细胞凋亡过程起始的重要因子,二乙酰吗啡可致神经元细胞凋亡,其与二乙酰吗啡致小脑颗粒神经元细胞凋亡之间关系尚未见报道。目的:验证二乙酰吗啡诱导小脑颗粒神经元细胞凋亡与caspase-8基因表达情况,明确caspase-8参与二乙酰吗啡致神经元凋亡过程。方法:取出生7 d SD大鼠小脑颗粒神经元细胞进行体外培养,第7天后,以不同质量浓度的二乙酰吗啡(10,40,80,100,120 mg/L)和C-jun氨基末端激酶通路特异性抑制剂SP600125作用小脑颗粒神经元细胞24 h,并分对照组(0 mg/L二乙酰吗啡),80 mg/L二乙酰吗啡组,二乙酰吗啡+SP 600125组;采用Hoechst 33258荧光染色观察细胞形态学改变,流式细胞仪测细胞凋亡率,免疫荧光、RT-PCR及Western Blotting检测caspase-8 mR NA和蛋白表达情况。结果与结论:1施加不同质量浓度二乙酰吗啡致神经元细胞凋亡,凋亡细胞出现透亮深蓝色的凋亡小体,细胞核呈现固缩、凝聚及断裂,随给药浓度增加细胞凋亡率呈现升高趋势(P0.05)。2与对照组相比,在80 mg/L二乙酰吗啡干预时caspase-8 mR NA和蛋白表达明显明显表达(P0.05);caspase-8 m RNA随给药浓度增加呈现升高趋势(P0.05),二乙酰吗啡+SP600125组中caspase-8 m RNA和蛋白较80 mg/L二乙酰吗啡组明显下调(P0.05)。结果提示caspase-8参与二乙酰吗啡致小脑颗粒神经元细胞凋亡过程,同时也是C-jun氨基末端激酶信号通路中的重要候选促凋亡因子。
【作者单位】： 新疆医科大学基础学院;广州中山大学医学院法医学系;新疆医科大学第一附属医院临床研究院;新疆医科大学第一附属医院科教中心;新疆维吾尔自治区司法鉴定科学技术研究所;新疆维吾尔自治区阿勒泰地区哈巴河县公安局法医室;
【关键词】： 海洛因 神经元 细胞凋亡 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶 组织构建 组织工程 二乙酰吗啡 小脑颗粒神经元 凋亡 半胱天冬氨酸蛋白酶(caspase-) HSLE JNK 国家自然科学基金
【基金】：国家自然科学基金项目(81260464) 新疆维吾尔自治区自然科学基金资助项目(青年科学基金项目)(2011211B20)~~
【分类号】：R363
【正文快照】： 0引言Introduction酰吗啡直接作用原代小脑颗粒神经元细胞,研究二乙酰吗啡海洛因即二乙酰吗啡,长期摄入会致白质脑病,又名诱导神经元凋亡与Caspase-8的关系。为海洛因海绵状白质脑病[1],在脑白质中形成海绵空泡样状特征性病理改变。有文献报道,二乙酰吗啡可致神经元1材料和方

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