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水通道蛋白3和8在消化系统的表达及其在炎症性肠病动物模型中的改变

发布时间:2017-09-12 22:50

  本文关键词:水通道蛋白3和8在消化系统的表达及其在炎症性肠病动物模型中的改变


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【摘要】:第一部分目的:研究水通道蛋白(Aquaporins, AQPs)3和8在正常消化系统的表达及分布情况并探讨其在消化系统中的功能。方法:9只正常SPF级SD大鼠处死,取食管、胃、十二指肠、空肠、回肠、结肠和肝组织,通过RT-PCR、western blot和免疫组织化学检测AQP3和AQP8的表达和分布情况。结果及结论:AQP3表达于复层鳞状上皮(食管和前胃)和单层柱状上皮细胞(腺胃、回肠、近端结肠和远端结肠)的基底侧膜上,而AQP8则表达于空肠、回肠和近端结肠的柱状上皮细胞的亚顶端膜区域,以及肝细胞的顶端膜上和亚顶端膜区域。第一部分目的:研究水通道蛋白(Aquaporins, AQPs)3和8在正常消化系统的表达及分布情况并探讨其在消化系统中的功能。方法:9只正常SPF级SD大鼠处死,取食管、胃、十二指肠、空肠、回肠、结肠和肝组织,通过RT-PCR、western blot和免疫组织化学检测AQP3和AQP8的表达和分布情况。结果及结论:AQP3表达于复层鳞状上皮(食管和前胃)和单层柱状上皮细胞(腺胃、回肠、近端结肠和远端结肠)的基底侧膜上,而AQP8则表达于空肠、回肠和近端结肠的柱状上皮细胞的亚顶端膜区域,以及肝细胞的顶端膜上和亚顶端膜区域。第二部分目的:研究2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的大鼠炎症性肠病模型中AQP3和AQP8表达及分布的改变并探讨其在炎症性肠病中的可能作用。方法:30只SPF级雌性Sprague-Dawley大鼠随机分为三组:模型组(n=18),酒精对照组(n=6),正常对照组(n=6)。实验第一天,模型组大鼠给予100mg/kgTNBS+50%乙醇灌肠,酒精对照组给予等体积的50%乙醇,正常对照组不给任何处理。实验第七天处死所有大鼠并取回肠、近端结肠和远端结肠组织,通过RT-PCR、western blot和免疫组织化学检测AQP3和AQP8的表达及分布的改变情况。结果:与酒精对照组和正常对照组相比,TNBS+50%乙醇灌肠组大鼠存在着明显的肠道炎症和损伤,同时AQP3和AQP8的nRNA和蛋白表达水平均降低,但其组织细胞定位并没有发生改变。结论:AQP3和AQP8在TNBS诱导的炎症性肠病中表达下调,因此其可能在炎症性肠病的发病中起一定的作用。第一部分目的:研究水通道蛋白(Aquaporins, AQPs)3和8在正常消化系统的表达及分布情况并探讨其在消化系统中的功能。方法:9只正常SPF级SD大鼠处死,取食管、胃、十二指肠、空肠、回肠、结肠和肝组织,通过RT-PCR、western blot和免疫组织化学检测AQP3和AQP8的表达和分布情况。结果及结论:AQP3表达于复层鳞状上皮(食管和前胃)和单层柱状上皮细胞(腺胃、回肠、近端结肠和远端结肠)的基底侧膜上,而AQP8则表达于空肠、回肠和近端结肠的柱状上皮细胞的亚顶端膜区域,以及肝细胞的顶端膜上和亚顶端膜区域。第二部分目的:研究2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的大鼠炎症性肠病模型中AQP3和AQP8表达及分布的改变并探讨其在炎症性肠病中的可能作用。方法:30只SPF级雌性Sprague-Dawley大鼠随机分为三组:模型组(n=18),酒精对照组(n=6),正常对照组(n=6)。实验第一天,模型组大鼠给予100mg/kgTNBS+50%乙醇灌肠,酒精对照组给予等体积的50%乙醇,正常对照组不给任何处理。实验第七天处死所有大鼠并取回肠、近端结肠和远端结肠组织,通过RT-PCR、western blot和免疫组织化学检测AQP3和AQP8的表达及分布的改变情况。结果:与酒精对照组和正常对照组相比,TNBS+50%乙醇灌肠组大鼠存在着明显的肠道炎症和损伤,同时AQP3和AQP8的nRNA和蛋白表达水平均降低,但其组织细胞定位并没有发生改变。结论:AQP3和AQP8在TNBS诱导的炎症性肠病中表达下调,因此其可能在炎症性肠病的发病中起一定的作用。第三部分目的:研究5-氨基水杨酸治疗TNBS诱导的大鼠结肠炎后AQP3和AQP8的表达改变并探讨其可能的机制。方法:60只SPF级雌性Sprague-Dawley大鼠随机分为五组,分别为酒精对照组、造模对照组、5-ASA 50mg/kg组、5-ASA 100mg/kg组5-ASA 150mg/kg组,每组12只。实验第1天,造模对照组、5-ASA 50mg/kg组、5-ASA 100mg/kg组和5-ASA150mg/kg组给予含2.5mg/ml TNBS的50%乙醇溶液100mg/kg体重灌肠,酒精对照组给予等体积的50%乙醇灌肠;实验第5天5-ASA 50mg/kg组、5-ASA 100mg/kg组(?)5-ASA 150mg/kg组分别给予5-ASA 50mg/kg、100mg/kg.150mg/kg口服,酒精对照组和造模对照组正常饮食;实验第14天处死所有大鼠,取近端结肠组织,通过RT-PCR和western blot检测AQP3和AQP8的表达改变情况。结果:与造模对照组相比,5-ASA 50mg/kg组、5-ASA 100mg/kg组和5-ASA150mg/kg组的CMDI、HPS和DAI评分均较低,伴随着结肠TNF-α表达下调,AQP3和AQP8的mRNA和蛋白表达水平明显上调。结论:TNBS诱导的大鼠结肠炎经过5-ASA治疗后,肠道炎症缓解,伴随AQP3和AQP8的mRNA和蛋白表达水平恢复。
【关键词】:AQP3 AQP8 大鼠 消化系统 AQP3 AQP8 大鼠 炎症性肠病 AQP3 AQP8 5-ASA 炎症性肠病
【学位授予单位】:复旦大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2014
【分类号】:R574;R-332
【目录】:
  • 缩略词表4-5
  • 中文摘要5-7
  • 英文摘要7-9
  • 前言9-11
  • 第一部分11-25
  • —、材料11-13
  • 二、方法13-18
  • 三、结果18-23
  • 四、讨论23-25
  • 第二部分25-38
  • 一、材料25
  • 二、方法25-28
  • 三、结果28-35
  • 四、讨论35-38
  • 第三部分38-46
  • 一、材料38
  • 二、方法38
  • 三、结果38-43
  • 四、讨论43-46
  • 全文总结46-47
  • 参考文献47-52
  • 综述52-62
  • 参考文献56-62
  • 附录一62-63
  • 附录二63-64
  • 致谢64-65

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 Alexandra Zahn;Christoph Moehle;Thomas Langmann;Robert Ehehalt;Frank Autschbach;Wolfgang Stremmel;Gerd Schmitz;;Aquaporin-8 expression is reduced in ileum and induced in colon of patients with ulcerative colitis[J];World Journal of Gastroenterology;2007年11期



本文编号:840004

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