应用TALEN技术敲除gata4基因建立斑马鱼先天性心脏病模型

发布时间：2017-09-15 17:40

  本文关键词：应用TALEN技术敲除gata4基因建立斑马鱼先天性心脏病模型

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【摘要】：目的人工构建TALEN靶向敲除载体敲除gata4基因,建立斑马鱼先天性心脏病动物模型。方法采用单元组装法构建靶向敲除gata4基因的载体,将其体外转录成TALEN mRNAs,通过显微注射的方式注入单细胞期受精卵中,胚胎检测TALEN的敲除效率,再通过剪尾、酶切、测序筛选发生基因突变的斑马鱼及突变的类型。结果酶切、测序结果证实成功构建出正确的gata4靶向敲除载体,注入斑马鱼受精卵中,发生基因敲除的效率为35.18%,通过剪尾、PCR、酶切检测成功地筛选出了发生基因突变的斑马鱼,测序结果显示出不同种类的gata4基因突变。结论成功构建gata4基因敲除的斑马鱼动物模型,为进一步研究人类gata4基因突变引起先天性心脏病的发病机制提供了良好的动物模型。
【作者单位】： 北京协和医学院研究生院;国家卫生计生委科学技术研究所;
【关键词】： TALEN gata基因 斑马鱼 模型 动物 先天性心脏病
【基金】：中央级公益性科研院所基本科研业务专项资金项目-优秀青年科技人才创业基金项目(编号:2012GJSSJKC02) 国家十二五科技支撑计划计划生育技术安全性评价标准化实验动物培育关键性共享技术研究项目(编号:2012BA131B06)
【分类号】：R541.1;R-332
【正文快照】： 。先天性心脏病(congenital heart disease,CHD)是由于胚胎发育过程中心脏、血管发育异常而导致心脏、血管在形态、结构、功能和代谢方面发生异常的一大类疾病,是人类极为普遍和具有破坏性的出生缺陷,发病率约占活产婴儿的0.8%[1],严重危害胎儿、新生儿、婴幼儿及儿童健康。目

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本文编号：857977