呼吸道合胞病毒的分离鉴定及其致病力的初步评价

发布时间：2017-09-16 02:24

  本文关键词：呼吸道合胞病毒的分离鉴定及其致病力的初步评价

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【摘要】：目的分离鉴定临床呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV),评价其致病力,为疫苗评价及致病机制的研究提供实验材料。方法收集临床呼吸道感染重症患儿的鼻咽分泌物样本进行RT-PCR初步鉴定,通过病毒培养,空斑纯化,电镜观察及病毒滴度测定,筛选出1株呼吸道合胞病毒候选株,经全基因组测序后命名为BJ016。选用14日龄C57乳鼠,每组26只,采用BJ016为实验组,PBS为对照组,分别对小鼠滴鼻感染,30μl/只。连续14日监测2组小鼠体质量变化及死亡率,肺组织的病毒载量、湿干比,HE染色观察肺病理变化并计数炎性细胞总量,同时采用CBA测定血清中细胞因子的变化。结果 100份临床呼吸道感染重症患儿鼻咽分泌物样本中,RT-PCR鉴定为RSV A亚型阳性共21例,经病毒分离培养、空斑纯化、电镜观察及RT-PCR鉴定后得到16株RSV临床分离株,通过TCID50测定病毒滴度筛选出1株滴度为106.5TCID50/ml的候选株,基因组序列分析显示其为NA1基因型,命名为BJ016。BJ016感染14日龄C57乳鼠后造成肺损伤,在第5日达到发病高峰时测定病载、湿干比、病理检测并计数炎性细胞,实验组较对照组具有明显统计学差异,血清中MCP-1、IL-6、G-CSF及MIP-1α均显著性升高。结论成功分离出1株能致死14日龄C57乳鼠的RSV病毒株并初步评价了其致病力,为疫苗评价及RSV致病机制的研究提供了良好的实验材料。
【作者单位】： 宁夏医科大学基础医学院病原生物学教研室;军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室;北京儿童医院病毒研究室;解放军第302医院肝胆外科;
【关键词】： RSV 病毒分离 C乳鼠 致病力
【基金】：国家“863”项目(SS2012AA020905)
【分类号】：R392
【正文快照】： RSV是严重危害婴幼儿健康的最常见呼吸道感染病原体。我国RSV发病的高峰季节主要是冬春季,首次感染多发生在1岁以内的婴幼儿,尤其是2~6个月的婴幼儿,感染后常引起婴幼儿细支气管炎和支气管肺炎等下呼吸道疾病,多表现为咳嗽、憋喘、高热,甚至呼吸困难、心力衰竭、死亡,给人类健

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本文编号：860343