MRC-5人二倍体细胞培养条件的优化
本文关键词:MRC-5人二倍体细胞培养条件的优化
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【摘要】:目的对MRC-5人二倍体细胞培养条件的优化比较。方法用3种不同的培养基将MRC-5人二倍体细胞在T25方瓶和Spinner培养系统Cytodex1微载体2种培养体系进行培养比较,每天观察细胞形态,进行细胞计数,绘制生长曲线,并检测葡萄糖-乳酸值,筛选出1种较适宜培养基,用不同级别的牛血清比较其生长增殖情况。结果 3种培养基在细胞形态,细胞的贴壁、分裂以及维持等方面无明显差异。但在增殖上,在2种培养体系中MEM(43.25±0.60)×104cells/m L,(12.98±1.27)×105cells/m L与M199(35.40±1.41)×104cells/m L,(10.76±1.31)×105cells/m L及DMEM/F12(36.75±1.59)×104cells/m L,(11.22±1.42)×105cells/m L比较,差异均有统计学意义(P0.01),MEM培养液细胞增殖5.17和6.49倍,优于M199和DMEM/F12培养液。进口胎牛血清细胞增殖(4.55±0.51)×105cells/m L,优于其他3种牛血清的(4.12±1.03)×105cells/m L、(3.59±0.48)×105cells/m L和(3.53±0.52)×105cells/m L。结论 3种培养基都可以用于MRC-5人二倍体细胞的繁殖培养,但MEM培养液更佳。进口胎牛血清较其他血清有优势。
【作者单位】: 浙江省医学科学院病毒病研究所;浙江普康生物技术股份有限公司;
【关键词】: MRC-人二倍体细胞 细胞生长周期 牛血清 微载体
【基金】:浙江省医学生物工程疫苗研究开发重点实验室(2008F3022) 浙江省公益技术研究社会发展项目(2014C33231)
【分类号】:R329.28
【正文快照】: 随着国家对生物制品行业要求的提高,人二倍体细胞基质的运用也越来越广泛。人二倍体细胞具有广泛的病毒敏感谱,是制备疫苗适宜的培养基质,相对于动物细胞,人二倍体细胞是来源于人体正常组织的体外培养细胞,无潜在致癌性,无外源因子污染,被广泛应用于疫苗的生产,是甲肝疫苗、水
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