缓释的碱性成纤维细胞生长因子、血管内皮细胞生长因子对于水凝胶中内皮祖细胞集落形成单位的影响

发布时间：2017-09-18 05:02

  本文关键词：缓释的碱性成纤维细胞生长因子、血管内皮细胞生长因子对于水凝胶中内皮祖细胞集落形成单位的影响

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【摘要】：目的研究碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)和血管内皮细胞生长因子(VEGF)对于水凝胶中内皮祖细胞集落形成单位(EPCs)增殖、分化、成熟,以及血管化的影响。方法制备分别含有b FGF/VEGF和不含b FGF/VEGF的精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)水凝胶,分为A、B 2组。同时包埋EPCs,流式细胞仪检测培养7 d后的细胞存活率,倒置显微镜观察EPCs的生长及长入水凝胶的情况并计数,分析b FGF、VEGF对EPCs存活率的影响。培养7 d后用定量实时聚合酶链反应(RT-PCR)检测总RNA量,并检测PECAM1、CD34、KDR、Angiopoietin-2、pcdh12基因的表达。然后用酶联免疫吸附分析(ELISA)法检测2组去水凝胶的培养上清液中基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9的表达,并用荧光法检测水凝胶的降解速度,b FGF、VEGF对EPCs释放MMP的影响。最后以鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)技术检测含有b FGF、VEGF的水凝胶体外诱导血管新生的作用。结果 A组水凝胶,消化7 d后,流式细胞仪检测发现39.43%的EPCs尚存,B组4.14%;两组相比,差异有统计学意义(P0.05)。水凝胶表面种植EPCs可观察到的细胞数A组为378.333 3,B组为302.333 3;两组相比,差异有统计学意义(P0.05)。ELISA法检测2组中MMP-2、MMP-9的表达,发现水凝胶中MMP-2和MMP-9随时间推移在72 h内持续释放,A组较B组释放浓度显著增加,差异有统计学意义(P0.05)。荧光法检测水凝胶的降解发现,从第1天开始,A组水凝胶降解百分比急速升高,之后增长速度减缓,而B组呈继续增长之势,差异有统计学意义。定量RT-PCR检测发现A组较B组基因Ct值高,且差异有统计学意义(P0.05)。CAM技术检测发现A组(空白组)、B组(不含b FGF、VEGF组)、C组(含b FGF、VEGF组)的新生血管总数分别为9、25、36;两两比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论体外研究证实,缓释的b FGF、VEGF不仅能促进水凝胶中EPCs增殖、分化、成熟,以及血管化,还能刺激血管新生。
【作者单位】： 华中科技大学
【关键词】： 碱性成纤维细胞生长因子(bFGF) 血管内皮细胞生长因子(VEGF) 内皮祖细胞集落形成单位(EPCs) 基质金属蛋白酶(MMP) 鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)技术 血管新生
【基金】：国家自然科学基金资助项目(81141077)
【分类号】：R329.2
【正文快照】： 血管新生(angiogenesis)是在原有血管网基础上,通过血管内皮细胞生长因子(vascular endothelialgrowth factor,VEGF)或内皮细胞形成新生血管的复杂过程[1]。VEGF促进血管内皮细胞生长并形成血管,构成血管网,加快侧支循环的建立,改善局部血液供应情况,从而起到治疗局部缺血的作

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 郑凯;梅斌;;Effects of Exogenous Sonic Hedgehog Peptide on Proliferation, Adhesion, Migration of Endothelial Progenitor Cells from Peripheral Blood[J];Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences);2013年03期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 郑凯;项帅;董汉华;王伟;孙以民;梅斌;;大鼠食管静脉曲张模型中VEGF参与内皮祖细胞的调控[J];华中科技大学学报(医学版);2014年06期

中国博士学位论文全文数据库 前1条

1 王宁;糖尿病对内皮祖细胞不同细胞亚群数量及EPCs表达TLR4的影响以及SDF-1对EPCs移植疗效的影响研究[D];新疆医科大学;2014年

中国硕士学位论文全文数据库 前3条

1 石皖荣;牛乳铁蛋白抗菌肽抗人肺癌细胞增殖及其作用机制研究[D];安徽医科大学;2013年

2 刘栋;阳离子抗癌肽HPRP-A1体外诱导癌细胞凋亡的实验研究[D];吉林大学;2014年

3 王晓茜;抗微生物肽和抗癌肽的特征信息提取及预测算法研究[D];内蒙古农业大学;2014年

【二级参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 朱智;陈刚;李兴睿;殷茜;杨志芳;易继林;;Endothelial Progenitor Cells Homing to the Orthotopic Implanted Liver Tumor of Nude Mice[J];Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences);2012年05期

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 荆明新;李盈祺;谢宝春;;不同刺激因子对狗骨髓CFU-C的影响[J];细胞生物学杂志;1985年03期

中国重要会议论文全文数据库 前1条

1 郎筠渊;翟海峰;吴萍;王季石;孙志强;陆林;;大鼠慢性暴露甲基苯丙胺后戒断期的免疫调节[A];贵州省2008年血液学年会论文汇编[C];2008年

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本文编号：873515