小鼠胚胎成纤维细胞对体外培养肺泡上皮Ⅱ型细胞干性的维持作用

发布时间：2017-09-21 08:36

  本文关键词：小鼠胚胎成纤维细胞对体外培养肺泡上皮Ⅱ型细胞干性的维持作用

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【摘要】：目的： 1.了解小鼠胚胎成纤维细胞作为滋养层对肺泡上皮II型细胞干性的维持作用。 2.建立肺泡上皮II型细胞使用滋养层的体外培养及传代的技术方法。 3.了解白血病抑制因子在AT2细胞的体外培养中对其生长状态以及其干性维持的作用。 方法： 用10ug/ml丝裂霉素C处理原代小鼠胚胎成纤维细胞（Mouseembryonic fibroblast cell，，MEF）使细胞失去有丝分裂能力的同时保持细胞功能活性。用处理后的MEF作滋养层来培养肺泡上皮Ⅱ型细胞（Alveolar type II cells，AT2），通过免疫荧光分别鉴定原代AT2细胞、传代后使用滋养层培养的AT2细胞，以及传代后不使用滋养层的AT2细胞。染色AT1标志物水通道蛋白5（Proteins-aquaporin5，AQP5）和AT2标志物肺泡表面活性蛋白C（Surfactant protein C，SPC）观察传代后使用了滋养层和未使用滋养层的AT2细胞染色情况，对比二者的不同。 结果： 1.传代后接种在MEF上的AT2细胞能够在培养第3天时形成克隆，并且能够连续传至第3代，而传代后未接种在MEF上培养的AT2细胞并没有形成铺路石样克隆生长，并且细胞生长形态扁平铺张。 2.免疫荧光鉴定显示传代后接种在MEF滋养层上的细胞为SPC阳性AQP5阴性，而未接种在MEF上培养的细胞为SPC阴性AQP5阳性。 结论： 使用丝裂霉素C处理的MEF作为滋养层培养AT2细胞能够在一定程度上维持AT2细胞的干性。
【关键词】：小鼠胚胎成纤维细胞 滋养细胞 肺泡上皮II型细胞
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R329.2
【目录】：

• 英汉缩略语名词对照5-6
• 摘要6-8
• ABSTRACT8-10
• 前言10-11
• 1 材料与方法11-21
• 2 结果21-22
• 3 讨论22-26
• 结论26-27
• 参考文献27-30
• 附插图30-36
• 文献综述36-42
• 参考文献40-42
• 致谢42-43
• 攻读学位期间发表论文情况43-44
• 攻读学位期间参研课题情况44-45

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前4条

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本文编号：893471