小分子干扰RNA沉默高迁移率族蛋白B1抑制肝星状细胞Ⅰ型和Ⅲ型胶原合成

发布时间：2017-09-22 11:38

  本文关键词：小分子干扰RNA沉默高迁移率族蛋白B1抑制肝星状细胞Ⅰ型和Ⅲ型胶原合成

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【摘要】：目的研究小分子干扰RNA(si RNA)干扰高迁移率族蛋白B1(HMGB 1)表达对肝星状细胞(HSC)Ⅰ型和Ⅲ型胶原表达的影响。方法将化学合成的HMGB 1基因特异性si RNA以脂质体包裹,转染HSC-T6细胞,设阴性对照和空白对照,抽提细胞总RNA和蛋白质,采用Western blot法检测细胞Ⅰ型和Ⅲ型胶原表达情况;采用细胞免疫荧光法检测Ⅰ型和Ⅲ型胶原表达与定位;采用酶联免疫吸附法检测培养上清液中Ⅰ型和Ⅲ型胶原水平。结果转染HMGB 1基因特异性si RNA的HSC-T6细胞Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白水平显著下调,免疫细胞化学检测也提示转染si RNA后细胞内Ⅰ型和Ⅲ型胶原水平较对照组明显降低;在培养72 h时,上清液Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原水平分别较对照组下降了(46.36±3.82)%和(41.92±3.58)%(F=33.14,P0.01;F=27.56,P0.01)。结论HMGB 1特异性si RNA能高效抑制HSC-T6细胞胶原的合成和分泌,因而可能具有预防和治疗肝纤维化的潜力。
【作者单位】： 上海交通大学医学院附属新华医院消化内科;
【关键词】： 肝星状细胞 小分子干扰RNA 高迁移率族蛋白B 胶原
【基金】：国家自然科学基金项目(编号:81200279)
【分类号】：R329.2
【正文快照】： 肝星状细胞(Hepatic stellate cells,HSC)的激活是肝纤维化发生发展的关键环节。HSC激活的始动因素是肝脏损伤和炎症反应,而HSC激活的过程包括早期启动和后期持续激活,激活的“持久性”是维持HSC激活状态及产生细胞外基质(Extracellular ma-trix,ECM),尤其是I型和Ⅲ型胶原的必

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 蒋玉凤;周德江;张建军;黄飞;史小玲;;肝纤维化相关细胞因子双重RNA干扰质粒的构建及转染肝星状细胞研究[J];实用肝脏病杂志;2012年06期

2 张莹;孔贺利;张建军;刘梅;任锋;刘霜;陈煜;段钟平;郑素军;;shRNA重组慢病毒沉默SMAD3对大鼠肝纤维化的抑制作用[J];实用肝脏病杂志;2014年03期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 陈晓丽;李杭;陈天武;;肝纤维化的磁共振定量诊断与分期研究进展[J];国际医学放射学杂志;2013年06期

2 何志国;赵永忠;卢青;周英琼;肖绪华;刘，

本文编号：900628