广州地区人呼吸道合胞病毒、副流感病毒及偏肺病毒等常见副粘病毒流行病学研究

发布时间：2017-09-24 02:18

  本文关键词：广州地区人呼吸道合胞病毒、副流感病毒及偏肺病毒等常见副粘病毒流行病学研究

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【摘要】：目的 急性呼吸道感染为临床上常见疾病，儿童及老年人发病率较高，病原体种类多。病毒感染与急性呼吸道感染发生及发展密切相关。副粘病毒科中呼吸道合包病毒（RSV），副流感病毒(PIVs)和偏肺病毒(hMPV)是常见的重要呼吸道病原体，可引起多种呼吸道疾病。目前实验室检测方法以荧光定量PCR和免疫荧光法为主，这2种方法有快速简便特点，但无法获取病毒毒株，尤其hMPV，限制了对病毒进一步的研究。因此建立3种副粘病毒分离培养方法获取毒株，尤其是hMPV，，为今后研究提供物质基础，具有十分重要的意义。 据报道3种副粘病毒在不同国家或地区不同人群中的发病率和所致疾病严重程度存在差异。广州地区地处亚热带，常见3种副粘病毒感染，但受人口卫生环境等因素影响，病毒的流行周期及所致疾病严重程度可能存在差异。但关于这方面的流行病学研究仍然甚少，尤其是较晚发现的hMPV。甚少研究同时囊括3种副粘病毒进行流行病学研究，比较感染临床特征，探索病毒间的差异。而且过去副粘病毒研究对象以儿童患者为主，较少阐述病毒对成人的影响，比较二者之间病程差异。 本研究通过收集广州地区急性呼吸道感染患者的鼻咽拭子，建立适用于3种副粘病毒的细胞分离培养方法，尤其是hMPV。同时描述3种副粘病毒在广州地区的流行病学特点，比较RSV、PIVs和hMPV临床特征，探索儿童与成人及3种病毒之间的临床特征差异。 方法 1.病例收集 收集2009.7-2011.9间广州地区急性呼吸道感染（ARTIs）患者的鼻咽拭子。荧光定量PCR（Real Time-PCR）检测常见呼吸道病毒。 2.病毒分离培养方法建立 挑选RSV、PIVs和hMPV阳性标本各60份用于病毒细胞分离培养。本研究采用离心培养法进行病毒分离培养。RSV和PIVs接种细胞后（HEp-2或LLC-MK2细胞）3,000rpm离心1h，连续培养5-10d。由于hMPV较难培养，分离方法有所不同，使用离心培养法基础上，接种Vero-E6细胞，且盲传3代，每代培养18d。同时利用hMPV毒株比较不同病毒培养方法(转鼓、离心和静置培养法)对病毒复制效率影响。 3.流行病学研究 统计3种副粘病毒感染率及描述病毒人群和季节分布，整理患者信息（相关个人信息、实验室检查信息和临床特征等），应用卡方检验和Fisher确切概率法比较患者的临床症状等，探索儿童与成人及3种病毒之间的临床特征差异。 结果 本研究从2009年7月-2011年9月开始收集急性呼吸道感染患者的呼吸道标本，共27个月，Real Time-PCR检测5424例标本，5111例标本符合入选标准，儿童患者（≤15岁）标本3089例，成人患者（≥15岁）标本2022例，男女比例是3094:2027。 5111例标本中，检出hMPV阳性175例，占3.4%。RSV阳性576例（10.4%），高于PIV，205例（4.0%）。成功分离出14株RSV、19株PIVs和3株hMPV。92.2%副粘病毒感染患者是儿童，儿童3种副粘病毒感染率28.5%（956/3089），高于成人患者3.7%（75/2022）。儿童患者中，3种副粘病毒患者的平均年龄，RSVPIVshMPV（RSV vs hMPV，p0.001）。与儿童患者不同，成人患者平均年龄RSVPIVshMPV。 通过27个月对急性呼吸道感染患者常见副粘病毒的监测发现，广州地区3种副粘病毒流行周期是相互重叠，RSV为主导。RSV和hMPV的流行季节较为相似，与Influenza流行周期也重叠。RSV和hMPV流行高峰出现在晚冬和初春，hMPV流行高峰一般会比RSV晚1个月出现，PIVs以PIV1和PIV3检出为主，占89.7%。PIV1和PIV3流行高峰相互重叠，夏季和秋季。 副粘病毒患者混合感染其他呼吸道病毒现象较为常见， Influenza、EV、HCoV和MP4种病原体是的3种病毒患者最常混合感染其他呼吸道病毒。比较3种副粘病毒临床特征，儿童患者临床症状较严重，成人患者病情较轻。儿童患者的临床特征以发热，咳嗽，咳痰，喘息，腹泻，纳差等为主。RSV与PIVs患儿常发展为肺炎，hMPV常发展为支气管肺炎。≤3岁的儿童比较中，RSV患者表现咳痰和厌吃更多，而PIVs患儿乏力和咽痛症状比其他2种病毒显著。发热和肺部Up音是hMPV患儿较显著的临床特征。成年人以流感样症状为主，hMPV患者全身症状比RSV患者明显。 结论 1、建立RSV、PIVs和hMPV分离培养方法，应用离心培养法能较有效分离出RSV和PIVs。同时离心培养法与盲传联合应用可实现hMPV分离培养，适合临床病毒实验室。 2、描述了广州地区RSV、PIVs和hMPV的流行病学特点，3种副粘病毒中，以RSV感染率最高，占主导。3种病毒流行周期相互重叠。≤3岁的儿童是病毒的主要感染人群。 3、通过比较3种副粘病毒患者临床特征发现，儿童比成人严重。 RSV、PIVs和hMPV临床特征及病情发展存在差异。与RSV和PIVs相比， hMPV同样是十分重要的病原体，不能被忽视。
【关键词】：呼吸道合胞病毒 副流感病毒 偏肺病毒 分离培养 临床特征
【学位授予单位】：广州医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R373
【目录】：

• 英文缩写表3-5
• 中文摘要5-8
• Abstract8-10
• 前言10-14
• 第一部分 常见副粘病毒分离培养方法建立14-32
• 1.1. 实验材料14-17
• 1.2. 实验方法17-23
• 1.3. 结果23-28
• 1.4 讨论28-32
• 第二部分 广州地区常见副粘病毒流行病学研究和临床症状比较32-46
• 2.1. 实验材料32
• 2.2. 实验方法32-33
• 2.3. 结果33-41
• 2.4 讨论41-46
• 结论46-47
• 参考文献47-53
• 综述53-63
• 参考文献58-63
• 攻读学位期间取得的研究成果（含发表的学术论文）63-64
• 致谢64-66

【参考文献】

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1 冯旰珠;周锋;黄茂;姚X;;热毒宁抗呼吸道合胞病毒(RSV,Long株)作用体外实验研究[J];南京医科大学学报(自然科学版);2007年09期

本文编号：908790