SOCE通道在CAPRI膜转位过程中作用的研究

发布时间：2017-09-24 09:28

  本文关键词：SOCE通道在CAPRI膜转位过程中作用的研究

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【摘要】：CAPRI是GAPIP4BP家族的成员之一，具有针对小G蛋白Ras、Rap的特异性GAP (GTPase-Activating Protein)活性。CAPRI蛋白内含C2A、C2B、GRD、PH/Btk四个结构域，其中C2A-C2B结构域具有钙离子结合能力，细胞质内钙离子浓度上升时C2A-C2B结构域介导CAPRI的膜转位；GRD为CAPRI功能结构域，具有RasGAP与RapGAP酶活性，可以使小G蛋白由GTP结合形式水解为GDP结合形式，从而使小G蛋白失活。现有的研究结果表明：当细胞在ATP、Histamine的刺激下， CAPRI从细胞质转位至细胞膜，并激活CAPRI的RasGAP与RapGAP活性。但是在不同的细胞中，GFP-CAPRI的膜转位存在差异，例如HeLa细胞膜中，GFP-CAPRI有较明显的半衰期，而HEK293细胞膜上观察不到这种现象。本研究旨在探讨在HEK293细胞中毒胡萝卜素（Tg）是否可以引起GFP-CAPRI的膜转位以及GFP-CAPRI膜转位与SOC通道之间的关系。研究结果显示，毒胡萝卜素（Tg）刺激HEK293细胞时诱导的SOCE参与CAPRI的膜转位。SOCE通道非特异阻滞剂2-APB，Gd3+以及使用sh-STIM1敲除内源性STIM1表达时，，均明显减弱Tg诱导的GFP-CAPRI膜转位，STIM1持续活化突变体（constitutive active）STIM1D76A即使不用毒胡萝卜素（Tg）刺激，亦可引起GFP-CAPRI膜转位。同时，在原代星型胶质细胞中，ATP不能够显著灭活Rap-GTP，而毒胡萝卜素（Tg）刺激细胞可以使内源性RapGTP结合形式减少，SOCE通道非特异性抑制剂Gd3+可以部分抑制上述现象。以上研究结果表明：HEK293细胞中SOCE通道参与Tg引起的GFP-CAPRI的膜转位。在原代星型胶质细胞中，SOCE通道可能通过CAPRI，调节Ras-MAPK信号通路。
【关键词】：CAPRI SOCE STIM1
【学位授予单位】：华中科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R329.2
【目录】：

• 英文缩略词表5-6
• 中文摘要6-7
• ABSTRACT7-8
• 前言8-9
• 材料与方法9-16
• 结果16-21
• 讨论21-23
• 参考文献23-27
• 综述27-41
• 参考文献34-41
• 致谢41

【共引文献】

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本文编号：910650