比较T7E1和Surveyor核酸内切酶对于点突变的检测效率

发布时间：2017-09-25 23:06

  本文关键词：比较T7E1和Surveyor核酸内切酶对于点突变的检测效率

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【摘要】：目的:比较T7E1和Surveyor核酸内切酶对于CRISPR-Cas9引起的点突变的错配剪切活性。方法:利用野生型和点突变的基因组DNA为模板,PCR扩增出突变位置的基因片段,用不同比例的野生型和点突变的PCR产物进行DNA杂交,分别用T7E1和Surveyor核酸内切酶对杂交后的产物进行切割,琼脂糖凝胶电泳分析结果。结果:当5%点突变DNA与95%野生型DNA杂交时,T7E1核酸内切酶剪切杂交产物的比例为9.5%,Surveyor核酸内切酶为3.2%;当点突变DNA与野生型DNA等比例杂交时,T7E1核酸内切酶剪切杂交产物的比例为45.6%,Surveyor核酸内切酶为26.4%;且T7E1和Surveyor核酸内切酶均能检测5%的突变DNA。结论:T7E1核酸内切酶检测点突变的效率高于Surveyor。
【作者单位】： 广西医科大学药学院药理学教研室;
【关键词】： TE Surveyor 点突变 杂交 错配剪切活性
【基金】：2011年度留学人员科技活动择优资助项目(No.人社厅函[2011]508号)
【分类号】：R3416
【正文快照】： 基因编辑在近十几年成为一项新兴且热门的技术,ZFNs,TALENS,CRISPR-Cas9技术都是利用核酸酶特异性切割目的基因序列[1]。被切开的DNA序列引发基因的损伤修复机制,非同源修复多为碱基的丢失、插入,同源修复需要特定的DNA模版,最终导致基因突变[2,3]。随着基因编辑技术的发展,快，

本文编号：920073