日本血吸虫过氧化物氧化还原蛋白SjPrxⅠ的原核表达及其免疫调节功能

发布时间：2017-09-27 16:00

  本文关键词：日本血吸虫过氧化物氧化还原蛋白SjPrxⅠ的原核表达及其免疫调节功能

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【摘要】：目的对日本血吸虫氧化还原蛋白(peroxiredoxin of schistosoma japonicum,SjPrx)的表达、纯化,接种小鼠和体外刺激脾细胞,研究SjPrx I在体内外诱导免疫应答的作用及可能机制。方法 Gen Bank获取SjPrx编码序列,设计合成引物进行PCR扩增;构建质粒,通过转化将构建的重组质粒转入感受态细胞,然后小量扩增菌株,电泳检测克隆成功表达。蛋白质印迹法(western blot,WB)验证融合蛋白后大量表达纯化。将重组SjPrxⅠ通过腹腔注射BALB/c小鼠,本科联免疫吸附实验和流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测脾细胞分泌细胞因子。结果成功构建了SjPrx I-p ET28a质粒,经异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(isopropylβ-D-thiogalactoside,IPTG)诱导表达后得到可溶性SjPrx I,纯化后的SjPrxⅠ免疫小鼠,其淋巴细胞高水平表达Th2细胞分泌的IL-4(t=6.69,P0.001)、IL-10(z=3.18,P=0.001)和IL-13(t=4.21,P=0.001)。结论制备了重组SjPrx I,初步认为其具有Th2型免疫调节功能,但并不能显著抑制体内业已存在的Th1的偏移。
【作者单位】： 安徽医科大学第一附属医院检验科;安徽省病原生物学省级实验室;
【关键词】： 血吸虫 日本 过氧化物氧化还原蛋白 Th型免疫应答
【基金】：国家自然科学基金(81171606)
【分类号】：R383.24
【正文快照】： (Chin J Dis Control Prev 2015,19(8):835-838)血吸虫病是一种广泛流行于热带、亚热带国家的传染性寄生虫病,传染人类的血吸虫主要有三种,埃及血吸虫、曼氏血吸虫和日本血吸虫,我国主要流行的是日本血吸虫病[1]。血吸虫早期感染以Th1反应为主;血吸虫尾蚴感染大约6周时雌虫开

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本文编号：930561