人血清中衰老相关循环microRNA表达谱

发布时间：2017-09-28 11:29

  本文关键词：人血清中衰老相关循环microRNA表达谱

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【摘要】：研究背景：微小核糖核酸(microRNAs)是一类长度约为18～25个核苷酸的非编码单链小分子RNA。血清miRNAs的发现以及他们在各种疾病患者中特异的表达谱使他们成为具有吸引力的、新型的用于诊断的非侵入性生物标志物。虽然血清小分子核糖核酸(microRNA)在诊断各种疾病中发挥重要作用, 人们很少知道循环microRNA与年龄的相关性。我们调查研究了四组123例不同年龄的健康个体血清microRNA表达谱,以鉴定随衰老改变的循环microRNA,然后我们建立了衰老的血清生物标志物。研究方法：Solexa测序技术用于初始的microRNA筛选,我们收集了21例平均年龄分别为22岁(y)的健康中国受试者(11例男性和10例女性)的血清样本混合汇集成一组血清样品库,同样,10例平均年龄为40 y的血清分为第二组,10例59y和9例70y各分为第三组和第四组。 另外,我们还获得了123例正常人的血清样本,每一个年龄段约31例。定量逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)用于测定血清中随年龄改变的microRNA的浓度。研究结果：Solexa测序提示有10个microRNA在衰老过程中表达显著改变。RT-qPCR分析确定了5个随年龄增长表达下调的microRNA (miR-29b, miR-106 b, miR-130b, miR-142-5p和miR-340)及3个随年龄增长表达上调的microRNA (miR-92 a, miR-222和miR-375)。最后,我们对这些衰老相关miRNA靶基因的蛋白质分类、相关疾病、分子功能和参与信号通路途径的进行进一步分析, 这些结果可应用于揭示衰老相关的miRNA在病理和生理过程中的调节作用。研究结论：血清microRNA的定量研究提供了一种新颖的、非创伤性的鉴定衰老过程的方法。我们的生物信息学分析为遗传咨询和未来潜在发展新的衰老治疗方法提供理论基础。
【关键词】：衰老 血清microRNA Solexa测序 RT-PCR 经典信号通路
【学位授予单位】：南京大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R339.38;Q78
【目录】：

• 摘要4-6
• Abstract6-9
• 第一章 综述部分9-18
• 一. miRNA的定义及发现历程10-11
• 1.1 miRNA的定义及特点10
• 1.2 miRNA的发现历程10-11
• 1.3 miRNA的重要性11
• 1.4 miRNA的命名11
• 二. miRNA的加工成熟过程及作用机制11-16
• 2.1 miRNA的加工成熟过程12-13
• 2.2 miRNA指导翻译抑制13-14
• 2.3 靶基因的识别14-16
• 三、衰老与miRNA的研究进展16-18
• 3.1 衰老的基本概况16
• 3.2 衰老与miRNA的关系16
• 3.3 衰老相关miRNA的线虫模型研究16-17
• 3.4 衰老相关miRNA的小鼠模型研究17
• 3.5 人衰老相关miRNA的组织模型研究17-18
• 第二章 实验部分18-41
• 一. 引言19
• 二. 实验材料和方法19-25
• 2.1 研究对象与血样收集19-20
• 2.2 仪器与试剂20-21
• 2.3 血清中RNA的抽提21
• 2.4 Solexa测序21-22
• 2.5 实时荧光qRT-PCR定量检测microRNA22-24
• 2.6 生物信息学分析24-25
• 2.7 数值统计分析25
• 三. 实验结果25-38
• 3.1 Solexa测序结果25-26
• 3.2 衰老相关血清microRNA表达谱的qRT-PCR验证26-29
• 3.3 衰老相关miRNA的靶基因分析29-38
• 四. 讨论38-41
• 参考文献41-44
• PUBLICATIONS44
• 专利44-45
• 致谢45-46

【共引文献】

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4 杨q，

本文编号：935605