HPV18 E5蛋白稳定表达株的筛选及对细胞增殖和周期的影响

发布时间：2017-09-30 21:35

  本文关键词：HPV18 E5蛋白稳定表达株的筛选及对细胞增殖和周期的影响

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【摘要】：本研究筛选能稳定表达HPV18E5蛋白的细胞株,并检测HPV18E5蛋白对细胞增殖及周期的影响。通过PCR方法扩增得到HPV18E5基因,经酶切和连接构建含His标签的pSecTag-HPV18E5真核表达质粒。运用脂质体介导的方法将重组质粒转染Balb/c3T3细胞,并用含有博来霉素的培养基筛选阳性细胞株。利用Western blot和免疫酶法鉴定HPV18E5在细胞中的表达。运用CCK-8法、流式细胞术检测HPV18E5对细胞增殖及细胞周期的影响。结果显示pSecTag-HPV18E5真核表达质粒构建成功;重组质粒转染Balb/c3T3细胞后,经400μg/mL博来霉素筛选21d,得到稳定表达HPV18E5蛋白的细胞株;与对照组相比,HPV18E5稳定表达细胞株的细胞增殖能力明显增强,细胞周期中S期的比值明显增加。研究表明HPV18E5对细胞增殖及细胞周期有影响。本结果为进一步深入研究HPV18E5蛋白的生物学特性及致癌作用奠定了基础。
【作者单位】： 北京工业大学生命科学与生物工程学院环境与病毒肿瘤学北京市重点实验室;中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所传染病预防控制国家重点实验室;
【关键词】： 人乳头瘤病毒型 E蛋白 细胞增殖 细胞周期
【基金】：国家自然科学基金项目(21277001) 北京市教育委员会科技计划重点项目(KZ201110005003) 传染病预防控制国家重点实验室自主研究重点课题(2011SKLID103) 北京工业大学基础基金(015000514314004)
【分类号】：R373
【正文快照】： 人乳头瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)是一种能引起皮肤和黏膜鳞状上皮增生的DNA肿瘤病毒[1]。迄今为止,已发现的人乳头瘤病毒多达170种[2-3]。高危型HPV,特别是HPV16、18型感染与人类多种癌症的发生发展密切相关[4]。研究表明,90%宫颈癌的发生与HPV16、18型的感染有关[5-6

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7 陆玲,黄为一,袁生,樊庆笙;钙在粟酒裂殖酵母细胞增殖过程中的效应[J];南京农业大学学报;2000年02期

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2 黄蓓;Gavin Porter;Haian Fu;;PRAS40对细胞增殖调控作用的初步研究[A];中国细胞生物学学会第九次会员代表大会暨青年学术大会论文摘要集[C];2007年

3 苗艳颖;侯忠赤;翁良;祝世功;;Ghrelin促进PC12细胞增殖的机制研究[A];中国神经科学学会第六届学术会议暨学会成立十周年庆祝大会论文摘要汇编[C];2005年

4 行书丽;贾伟;吴士良;;人类β3GalT7/GNT8对HL-60细胞增殖与侵袭特性的影响[A];华东六省一市生物化学与分子生物学会2008年学术交流会论文摘要汇编[C];2008年

5 李扬;宋长城;罗松;宋小元;齐建国;王永潮;;IDl对细胞增殖、分化和调亡的影响[A];中国动物学会全国显微与亚显微形态科学分会第十次形态科学与显微注射技术学术研讨会论文摘要集[C];2000年

6 林亚秋;庞卫军;杨公社;;TNF-α对大鼠脂肪细胞增殖与凋亡的影响[A];中国细胞生物学学会2005年学术大会、青年学术研讨会论文摘要集[C];2005年

7 邹伟;;Caveolin-1及其生理功能多样性[A];“基因、进化与生理功能多样性”海内外学术研讨会暨中国生理学会第七届比较生理学学术会议论文摘要[C];2009年

8 邓锦波;牛艳丽;范文娟;刘彬;;死亡受体5与神经细胞增殖[A];Proceedings of the 8th Biennial Conference of the Chinese Society for Neuroscience[C];2009年

9 陈勇;吕合作;胡建国;李柏青;;可刺激人γδT细胞增殖的结核杆菌多肽抗原的生物学特性分析[A];中国免疫学会第四届学术大会会议议程及论文摘要集[C];2002年

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本文编号：950558