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慢性应激对性动机的影响以及睾丸vimentin、AR表达的变化

发布时间:2017-10-02 08:26

  本文关键词:慢性应激对性动机的影响以及睾丸vimentin、AR表达的变化


  更多相关文章: 慢性应激 性动机 凋亡 波形蛋白 雄性激素受体


【摘要】:目的:一些临床研究和基础研究表明,慢性应激与性动机、性觉醒等高级心理过程密切相关,可能导致机体情绪调节异常,引起机体对各种心理和精神疾病的易感性提高。睾丸是雄性生殖器官,对于维持正常的性偏爱行为、性觉醒以及进行性交配具有重要作用。正常的生精作用对于维持生殖功能具有很重要的作用。慢性应激可能会导致生精细胞凋亡增加,导致生精细胞数目减少,从而影响生殖功能。波形蛋白、雄性激素受体作为在睾丸上表达的蛋白,对于维持正常的生精功能具有重要作用。本研究通过建立动物模型,探索慢性应激对性动机行为的影响;检测睾丸上细胞凋亡水平在慢性应激作用下发生的改变;并检测慢性应激作用下睾丸波形蛋白、雄性激素受体是否发生改变,从而探讨慢性应激状态下,性动机改变的可能原因。 方法:将雄性Sprague-Dawley大鼠16只随机分为对照组和模型组,使用慢性不可预见温和应激(CUMS)方法建立大鼠慢性应激模型。情绪状态的检测采取糖水消耗实验和旷场实验,通过这两个实验检测大鼠慢性应激模型是否建立成功。性动机行为通过Agmo提出性偏好行为检测装置进行检测,探讨动物性动机行为是否受慢性应激的影响。行为实验后,进一步研究睾丸细胞结构变化情况,采用tunel检测睾丸各部位细胞凋亡水平分布情况变化。同时采用Western blotting方法,检测睾丸中波形蛋白、雄性激素受体蛋白总量的改变,采用免疫组织化学方法检验睾丸各具体位置中蛋白表达分布情况。 结果:(1)由多种行为实验的结果可知,慢性应激模型建立成功,同时慢性应激导致大鼠性动机损伤。首先,模型组在糖水消耗实验中对糖水偏好下降,在旷场实验中表现出探索欲望下降、活动能力下降,这些说明慢性应激模型建立成功。性动机行为实验中当雌鼠在发情期时,模型组在雌鼠区停留时间减少,,表明慢性应激状态下大鼠的性动机下降。 (2)慢性应激引起大鼠睾丸细胞的凋亡表达上升。激光共聚焦显微镜观察结果为生精小管中的精原细胞、精母细胞凋亡表达上升;生精小管间隙间质细胞凋亡增加。 (3)慢性应激引起睾丸波形蛋白、雄性激素受体蛋白表达下调。Western blotting检测睾丸细胞总蛋白发现慢性应激使得睾丸中波形蛋白、雄性激素受体总量改变。免疫组化分析表明波形蛋白在生精小管基底部支持细胞中表达减少,雄性激素受体在生精细胞中表达减少。 结论:慢性应激引发大鼠情绪调节障碍和性动机障碍;并伴有睾丸上皮生精细胞、间质细胞和支持细胞的凋亡现象;大鼠睾丸各级生精细胞均有波形蛋白表达下调,支持细胞、间质细胞和精母细胞雄性激素受体表达下调,这些表明上述两个蛋白参与慢性应激对大鼠性动机影响的过程。这些结果为进一步探明慢性应激引发生殖功能异常的机制提供了实验证据,并提示波形蛋白、雄性激素受体蛋白可能对治疗慢性应激引起的性动机障碍具有一定的临床价值。
【关键词】:慢性应激 性动机 凋亡 波形蛋白 雄性激素受体
【学位授予单位】:浙江理工大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2013
【分类号】:R363
【目录】:
  • 摘要4-6
  • Abstract6-8
  • 目录8-12
  • 表目录12-13
  • 图目录13-14
  • 缩略语14-15
  • 引言15-17
  • 第一章 综述17-31
  • 1.1 慢性应激对性动机的影响17-19
  • 1.1.1 性动机的概念和评价17-18
  • 1.1.2 慢性应激对性动机的影响18-19
  • 1.2 慢性应激对性行为的影响19-20
  • 1.3 慢性应激对睾丸结构的影响20-24
  • 1.3.1 慢性应激对生精细胞的影响21-22
  • 1.3.2 慢性应激与支持细胞22-23
  • 1.3.3 慢性应激与间质细胞23-24
  • 1.4 波形蛋白与生殖24-27
  • 1.4.1 波形蛋白与支持细胞结构24-25
  • 1.4.2 波形蛋白与精子形成过程25-26
  • 1.4.3 波形蛋白与应激26-27
  • 1.5 雄性激素受体与生殖27-29
  • 1.5.1 雄性激素受体27-28
  • 1.5.2 雄性激素受体在性行为中的作用28-29
  • 1.5.3 雄性激素受体与应激29
  • 1.6 结语29-31
  • 第二章 研究设计31-36
  • 2.1 研究目的31
  • 2.2 研究意义31-32
  • 2.2.1 理论意义31
  • 2.2.2 实践意义31-32
  • 2.3 研究内容与创新32-33
  • 2.3.1 研究内容32
  • 2.3.2 研究创新32-33
  • 2.4 研究假设33
  • 2.5 研究方法和技术路线33-36
  • 2.5.1 研究方法33-34
  • 2.5.2 技术路线34-36
  • 第三章 实验一:慢性应激对大鼠的情绪影响36-43
  • 3.1 材料与方法36-38
  • 3.1.1 动物及分组36
  • 3.1.2 实验器材36-37
  • 3.1.3 实验试剂37
  • 3.1.4 建立慢性应激大鼠模型37
  • 3.1.5 旷场实验37-38
  • 3.1.6 糖水消耗实验38
  • 3.1.7 统计学处理38
  • 3.2 结果38-41
  • 3.2.1 旷场实验38-40
  • 3.2.3 糖水消耗实验40-41
  • 3.3 讨论41-43
  • 3.3.1 慢性应激模型41
  • 3.3.2 慢性应激对情绪变化的影响41-42
  • 3.3.3 小结42-43
  • 第四章 实验二:慢性应激对大鼠性动机行为的影响43-52
  • 4.1 材料与方法43-45
  • 4.1.1 实验动物43
  • 4.1.2 实验器材及试剂43-44
  • 4.1.3 雌鼠发情周期检测44
  • 4.1.4 性动机行为检测44-45
  • 4.1.5 统计学处理45
  • 4.2 结果45-49
  • 4.2.1 雌鼠发情周期确定45-46
  • 4.2.2 移动距离46
  • 4.2.3 雌鼠偏爱分数46-47
  • 4.2.4 雌/雄鼠刺激区停留时间47-49
  • 4.3 讨论49-52
  • 第五章 实验三慢性应激对睾丸细胞凋亡的影响52-57
  • 5.1 材料与方法52-54
  • 5.1.1 动物及分组52
  • 5.1.2 仪器及设备52-53
  • 5.1.3 试剂及药品53
  • 5.1.4 组织固定步骤53-54
  • 5.1.5 Tunel 检测54
  • 5.2 结果54-56
  • 5.2.1 睾丸组织中 Tunel 表达的变化54-56
  • 5.3 讨论56-57
  • 第六章 实验三:慢性应激对波形蛋白表达的影响57-67
  • 6.1 材料与方法57-61
  • 6.1.1 动物及分组57
  • 6.1.2 仪器及设备57-58
  • 6.1.3 试剂及药品58-60
  • 6.1.4 试剂的配置60-61
  • 6.1.5 Western blotting 检测61
  • 6.1.6 免疫组织化学检测61
  • 6.1.7 统计方法61
  • 6.2 结果61-64
  • 6.2.1 大鼠睾丸组织波形蛋白表达免疫印迹分析61-62
  • 6.2.2 大鼠睾丸组织波形蛋白表达免疫组化结果62-64
  • 6.3 讨论64-67
  • 6.3.1 慢性应激导致大鼠睾丸波形蛋白表达降低64-65
  • 6.3.2 波形蛋白表达同大鼠睾丸凋亡关系65-67
  • 第七章 实验四:慢性应激对大鼠睾丸雄性激素受体表达的影响67-75
  • 7.1 材料与方法67-69
  • 7.1.1 动物及分组67
  • 7.1.2 仪器及设备67
  • 7.1.3 试剂及药品67-68
  • 7.1.4 试剂的配置68
  • 7.1.5 Western blotting 检测68
  • 7.1.6 免疫组织化学检测68
  • 7.1.7 统计方法68-69
  • 7.2 结果69-72
  • 7.2.1 大鼠睾丸组织 AR 表达免疫印迹分析69-70
  • 7.2.2 大鼠睾丸组织 AR 表达免疫组化结果70-72
  • 7.3 讨论72-75
  • 第八章 总结与展望75-77
  • 8.1 讨论与总结75-76
  • 8.2 不足与展望76-77
  • 参考文献77-84
  • 附录 184-85
  • 附录 285-86
  • 附录 386-87
  • 附录 487-88
  • 致谢88

【共引文献】

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1 周永翠;三个新的精子发生相关基因在人和小鼠睾丸中的表达特征[D];汕头大学;2009年



本文编号:958548

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