安徽地区卡波氏肉瘤相关疱疹病毒流行病学研究

发布时间：2017-10-03 00:07

  本文关键词：安徽地区卡波氏肉瘤相关疱疹病毒流行病学研究

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【摘要】：目的：为了了解KSHV在安徽地区的正常人群与男男性接触者(MSM))中的血清感染率，开展KSHV在安徽地区人群感染情况的研究，并初步分析KSHV感染的危险因素。为继续开展KSHV在中国的流行病学调查与相关分子生物学分析，，预防KSHV的发生与截断其传播途径提供科学依据。 方法：利用原核表达载体pQE-80L和大肠杆菌BL21（DE3）菌株表达了融合His的重组病毒蛋白ORF65、ORF73和ORF K8.1蛋白。通过Ni2+亲和层析获得高纯度的ORF65、ORF73和ORF K8.1蛋白，Western blot检测其具有反应性。利用这些蛋白作为抗原建立和优化了血清学检测KSHV的ELISA方法。利用已建立血清学检测方法，调查了安徽蚌埠地区1008份普通人群血清、合肥地区1000份普通人群血清、安庆地区1006份普通人群血清以及安徽省15市158份HIV阳性男男性接触者(MSM)人群血清的KSHV流行病情况。运用SPSS软件对结果进行分析处理。 结果：①安徽蚌埠地区普通人群中KSHV抗体的总阳性率为4.3%，男性阳性率为3.9%，女性阳性率为4.6%。统计学分析显示，KSHV感染率在性别和年龄上无差异。亚型分析结果显示，安徽蚌埠地区两个KSHV K1序列与EMA7的K1序列亲缘关系较近，且这两个亚型都属于A亚型。 ②安徽合肥地区普通人群中KSHV抗体的总阳性率为4%，男性阳性率为5.9%，女性阳性率为4.6%。统计学分析显示，KSHV感染率在性别和年龄上无差异，但是KSHV的感染率和肿瘤的发生具有明显相关性(P=0.007)。 ③安徽安庆普通人群中KSHV抗体的总阳性率为5.3%，男性阳性率为5.6%，女性阳性率为5.5%。统计学分析显示，KSHV感染率与梅毒感染间有显著相关性(P=0.03)，但是其与年龄、性别、血型及乙肝五项间无明显相关性。 ④安徽省15市HIV阳性MSM人群中KSHV抗体的总阳性率为12%。统计学分析显示，HIV阳性的MSM人群20~29岁、30~39岁的年龄因素以及性病感染史与KSHV抗体阳性率之间具有明显相关性。 结论：在中国安徽地区的普通人群KSHV的感染率较低，且KSHV的感染与年龄及性别之间无明显相关性。在对合肥、安庆样本分析表明KSHV的感染和肿瘤的发生以及梅毒的感染间具有显著相关性，认为肿瘤发生和梅毒感染是KSHV感染的危险因素。安徽地区HIV阳性男同性恋患者的KSHV总抗体阳性率明显高于普通人群，HIV感染是KSHV血清抗体阳性的高危因素之一，并且此人群样本KSHV的抗体阳性率和性病史明显相关，因此表明性接触是KSHV感染的一个高风险因素，即性途径传播是KSHV传播的一个重要途径。
【关键词】：卡波氏肉瘤相关疱疹病毒 血清阳性率 安徽 流行病学调查
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R373.11
【目录】：

• 英文缩略词表6-8
• 中文摘要8-10
• Abstract10-13
• 1 前言13-14
• 2 材料与方法14-24
• 2.1 材料14-16
• 2.1.1 质粒和菌株14
• 2.1.2 血清样本14-15
• 2.1.3 试剂15
• 2.1.4 仪器和设备15-16
• 2.2 方法16-24
• 2.2.1 溶液的配制16-20
• 2.2.2 感受态的制备20
• 2.2.3 含目的基因表达载体的构建20
• 2.2.4 目的蛋白诱导表达20-21
• 2.2.5 目的蛋白的纯化21
• 2.2.6 纯化样品的SDS-PAGE电泳与浓度检测21-22
• 2.2.7 目的蛋白反应性的Western检测22
• 2.2.8 KS病人血清KSHV抗体的检测及条件优化22
• 2.2.9 安徽地区KSHV血清学检测22-23
• 2.2.10 HHV-8的基因分型23
• 2.2.11 统计学分析23-24
• 3. 结果24-39
• 3.1 KSHV ORF65、ORF73和ORF K8.1重组质粒的鉴定24-25
• 3.2 KSHV ORF65、ORF73和ORF K8.1的表达与纯化25-27
• 3.3 KSHV ORF65、ORF73和ORF K8.1的反应性分析27-28
• 3.4 以KSHV ORF65、ORF73和ORF K8.1蛋白为抗原的ELISA体系建立与优化28-29
• 3.5 安徽地区KSHV流行病学调查结果29-39
• 3.5.1 蚌埠地区KSHV流行病学调查结果29-32
• 3.5.1.1 蚌埠地区KSHV血清学检测结果29-31
• 3.5.1.2 蚌埠地区KSHV亚型分析结果31-32
• 3.5.2 合肥地区KSHV血清学检测结果32-34
• 3.5.3 安庆地区KSHV血清学检测结果34-36
• 3.5.4 安徽HIV阳性MSM人群KSHV血清学检测结果36-39
• 4. 讨论39-42
• 5. 结论42-43
• 5.1 KSHV抗体阳性检测方法的建立42
• 5.2 安徽蚌埠、合肥和安庆地区普通人群KSHV血清抗体阳性率调查42
• 5.3 安徽省15市HIV阳性的MSM人群KSHV血清抗体阳性率调查42-43
• 参考文献43-47
• 附录47-48
• 致谢48-49
• 综述49-58
• 参考文献56-58

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本文编号：962016