臭氧水对兔膝骨性关节炎作用的实验研究

发布时间：2017-12-08 09:06

  本文关键词：臭氧水对兔膝骨性关节炎作用的实验研究

  更多相关文章： 骨性关节炎 臭氧水 滑膜 软骨 IL-6 TNF-α VEGF

【摘要】：研究背景骨性关节炎(Osteoarthritis,OA)作为中老年人群中发病率较高的一种慢性、退行性疾病,最常累及膝关节,致残率高,给患者带来极大痛苦。其发病机制相当复杂,由于机械性、生物性等多方面因素的影响,OA以关节软骨的病变最为突出。而滑膜炎是OA诸多炎症反应的主要表现之一,可引起骨性关节炎早期的临床症状,进而影响关节软骨的改变。目前针对膝骨性关节炎的治疗方法多种多样,临床上主要应用非阿片类消炎止痛药或阿片类药物缓解疼痛,关节腔内注射玻璃酸钠或臭氧改善骨关节炎症状,手术治疗用于晚期及严重疼痛的骨关节炎患者,其他各种治疗方法,包括中医疗法也常被应用于该疾病。尽管临床上臭氧水用于膝骨性关节炎效果明确,但与其相应的实验研究未见报道。本实验通过关节腔注射臭氧水对兔膝骨性关节炎模型进行干预,对比实验动物关节活动度的变化,观察关节软骨及滑膜的病理变化,利用酶联免疫吸附测定法检测各组实验动物关节滑膜中IL-6、TNF-α和VEGF的含量,评价臭氧水对兔膝骨性关节炎的影响,对其作用机制进行探讨。目的观察臭氧水对兔膝关节软骨和滑膜的作用,及对滑膜中IL-6、TNF-α和VEGF的影响,分析臭氧水治疗膝骨性关节炎的相关机制。方法1.动物模型建立与干预新西兰兔32只,雌雄各半,采用随机数字表法分为4组,A组:空白对照组,B组:模型对照组,C组:臭氧水对照组,D组:臭氧水治疗组,每组8只。A组不予任何处理;B组仅造兔骨关节炎模型;C组仅关节腔注射20μg/ml臭氧水2ml,每周1次,共3次;D组造模成功后,臭氧水注射方法同C组。2.软骨和滑膜标本HE染色观察软骨和滑膜标本制作成病理切片,分别在光镜下观察软骨组织学形态以及滑膜组织有无细胞增生及组织变性、结构是否完整、是否有炎性细胞浸入、有无细胞坏死。3.ELISA法检测兔膝关节滑膜中IL-6、TNF-α及VEGF在不同分组中表达含量有无差异。4.统计学处理相关实验数据采用SPSS 17.0统计学软件处理,检验水准α=0.05,P≤0.05表示差异有统计学意义。结果1.膝关节活动度观察B、D组造模后关节活动度均小于A组(P0.05);B组处死时与造模后比较差异无统计学意义(P0.05);D组处死时较B组处死时关节活动度大(P0.05);D组处死时较造模后关节活动度增大(P0.05)。2.膝关节滑膜厚度观察与A组相比,B、D组滑膜明显更厚(P0.05);C组与A组差别无统计学意义;D组滑膜较B组薄(P0.05)。3.软骨和滑膜标本HE染色观察A组软骨表面完整,四层结构清晰,细胞排列整齐,潮线完整;B组软骨表面粗糙不规则,可见明显裂隙,软骨层变薄,细胞数量减少,排列紊乱;C组软骨各层结构清晰,软骨细胞排列较整齐,软骨纤维细胞未见增多;D组软骨表面不规则缺损较B组为轻,软骨细胞数量减少,散在分布,结构排列尚整齐。A组滑膜组织未见充血水肿,滑膜细胞无增生现象,滑膜组织结构正常;B组滑膜组织失去正常结构,细胞增生明显,炎性细胞浸润严重,血管增生充血,滑膜厚度较A组显著增加;C组滑膜无炎症表现;D组滑膜组织炎症细胞减少,充血水肿减轻,滑膜厚度较B组明显降低。4.ELISA法检测结果与A组相比,C组滑膜组织IL-6、TNF-α和VEGF表达增高不明显(P0.05),B、D两组滑膜组织IL-6、TNF-α和VEGF表达增高(P0.05);D组较B组滑膜中IL-6、TNF-α、VEGF表达降低(P0.05)。结论1.关节腔注射20μg/ml臭氧水2ml,能有效抑制兔膝骨性关节炎的病理损害及滑膜组织中IL-6、TNF-α、VEGF的表达水平,改善膝关节活动度;2.20μg/ml臭氧水对兔正常膝关节组织结构及滑膜中IL-6、TNF-α、VEGF的表达无影响,安全性较高。
【学位授予单位】：郑州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R684.3

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