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ADAM17-shRNA转染的骨髓间充质干细胞对裸鼠乳腺癌移植瘤生长的影响

发布时间:2018-01-24 02:37

  本文关键词: 解聚素-金属蛋白酶-sh RNA 乳腺癌 MCF-细胞 骨髓间充质干细胞 出处:《中国肿瘤生物治疗杂志》2017年10期  论文类型:期刊论文


【摘要】:目的:探讨转染解聚素-金属蛋白酶17-shRNA(a disintegrin and metalloprotease 17-shRNA,ADAM17-shRNA)的骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenehymal stem cells,BMMSC)对乳腺癌MCF-7细胞裸鼠移植瘤的抑制效果。方法:全骨髓贴壁法分离并培养3周雄性SD大鼠的BMMSC,利用慢病毒介导的ADAM17-shRNA转染BMMSC。30只裸鼠建立MCF-7乳腺癌移植瘤模型,种植肿瘤细胞14 d后建模成功。按照数字表法随机分成对照组(注射等量PBS)、BMMSC组(注射1×10~6/ml BMMSC)和转染组(注射1×10~6/ml转染ADAM17-shRNA的BMMSC),每组10只。在种植细胞第15天开始经尾静脉注射BMMSC进行抑瘤实验(0.1 ml/只,每3 d给药1次,共计5次),观察裸小鼠移植瘤的生长情况;抑瘤实验16 d后处死裸鼠。利用Real-time PCR法检测移植瘤组织ADAM17 mRNA表达,Western blotting法检测移植瘤组织ADAM17蛋白表达。结果:抑瘤实验16 d时,对照组、BMMSC组移植瘤体积明显高于转染组[(787.15±25.95)、(767.02±28.98)vs(361.89±19.75)mm~3,均P0.01];BMMSC组、转染组抑瘤率明显高于对照组(2.57%、53.89%vs 0.00%,均P0.05)。对照组、BMMSC组ADAM17 mRNA的表达水平明显高于转染组(1.00±0.01、0.97±0.08 vs 0.30±0.09,均P0.05);对照组、BMMSC组ADAM17蛋白表达水平明显高于转染组(0.70±0.09、0.68±0.02 vs 0.45±0.05,均P0.05)。结论:ADAM17-shRNA通过BMMSC介导可将ADAM17靶向归巢至裸鼠乳腺癌移植瘤并发挥抑瘤作用。
[Abstract]:Objective: to investigate the transfection of disintegrin and metalloprotease 17-shRNA into depolymerin-metalloproteinase-17-shRNA. The bone marrow mesenchymal stem cells (marrow mesenehymal stem cells) of ADAM17-shRNAs. Methods: BMMSC of male SD rats was isolated and cultured for 3 weeks by whole bone marrow adherent method. The model of MCF-7 breast cancer transplantation was established in nude mice transfected with BMMSC.30 by lentivirus-mediated ADAM17-shRNA. The tumor cells were successfully established 14 days after implantation and were randomly divided into two groups according to the digital table method: the control group was injected with the same amount of PBSs. BMMSC group (1 脳 10 ~ (-6) / ml BMMSC) and transfection group (1 脳 10 ~ (6) / ml BMMSC-transfected ADAM17-shRNA). 10 mice in each group were injected with BMMSC through caudal vein on the 15th day of implantation for 0.1 ml / mouse tumor inhibition test, once every 3 days, a total of 5 times). The growth of transplanted tumor in nude mice was observed. The nude mice were killed after 16 days of tumor inhibition experiment and the expression of ADAM17 mRNA was detected by Real-time PCR method. Western blotting method was used to detect the expression of ADAM17 protein in transplanted tumor tissue. Results: the volume of transplanted tumor in the control group was significantly higher than that in the transfected group at 16 days after tumor inhibition experiment. [787. 15 卤25. 95 mil. 767.02 卤28. 98 m / s ~ 361.89 卤19. 75 m / m ~ (-1), respectively (P0.01); In the BMMSC group, the tumor inhibition rate in the transfection group was significantly higher than that in the control group (P < 0.05). The expression of ADAM17 mRNA in BMMSC group was significantly higher than that in transfection group (1.00 卤0.01) 0.97 卤0.08 vs 0.30 卤0.09. P0.05; The expression of ADAM17 protein in the control group was significantly higher than that in the transfected group (0.70 卤0.09 卤0.68 卤0.02 vs 0.45 卤0. 05). Conclusion the ADAM17 targeting homing to breast cancer transplanted into nude mice can be mediated by BMMSC and play a role in tumor inhibition.
【作者单位】: 华北理工大学附属医院肿瘤外科;华北理工大学基础医学院病理学系;华北理工大学冀唐学院图书馆;
【基金】:唐山市科学技术研究与发展计划资助项目(No.14130256B)~~
【分类号】:R737.9
【正文快照】: [Chin J Cancer Biother,2017,24(10):1088-1092.DOI:10.3872/j.issn.1007-385X.2017.10.008]解聚素-金属蛋白酶17(adisintegrin and metallo-protease-17,ADAM17)可通过激活EGFR促进乳腺癌的增殖和侵袭[1-2]。骨髓间充质干细胞(bone marrowmesenehymal stem cells,BMMSC)是来

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