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Ilk对LPS诱导小鼠乳腺上皮细胞分泌炎性因子的影响

发布时间:2018-03-01 10:49

  本文关键词: 乳腺上皮细胞 Ilk基因 炎性因子 出处:《中国兽药杂志》2017年02期  论文类型:期刊论文


【摘要】:为探究Ilk对LPS诱导小鼠乳腺上皮细胞(MECs)分泌炎性因子IL-8、TNF-α的影响,采用siRNA技术筛选最佳转染条件,q PCR法和ELISA法检测siRNA转染后下游蛋白Akt1的表达来评价Ilk沉默,ELISA法检测Ilk沉默后对小鼠MECs分泌炎性因子IL-8、TNF-α的影响。结果显示:选用Ilk-mus-595片段的20 n M转染组可极显著抑制Ilk的mRNA表达(P0.01),转染效率最好,达84.83%;Ilk转染后可显著减少LPS介导的Akt1 mRNA的转录和蛋白表达(P0.05);可显著减少LPS介导的TNF-α分泌(P0.05),但各组IL-8的量无变化(P0.05)。结果提示:利用siRNA成功转染的Ilk可以影响细胞内Akt1的表达,降低细胞分泌的TNF-α含量,Ilk可能与小鼠MECs的抗炎有关,可作为靶基因进行更加深入的研究,以期为乳腺炎症的治疗提供新的思路及数据参考。
[Abstract]:In order to explore Ilk on LPS induced mouse mammary epithelial cells (MECs) secretion of inflammatory cytokines IL-8, TNF- alpha, using siRNA technology to screen the best conditions of transfection, the expression of Q PCR and ELISA siRNA was detected after transfection of downstream protein Akt1 to evaluate Ilk silencing, detection of Ilk silencing ELISA method after the secretion of inflammatory factor of IL-8 effect of mouse MECs, TNF- alpha. The results showed that 20 N M transfection group selected fragments of Ilk-mus-595 could significantly inhibit the expression of Ilk mRNA (P0.01), the best transfection efficiency, up to 84.83%; after Ilk transfection can significantly reduce transcription and protein expression of LPS mediated Akt1 mRNA (P0.05) can significantly reduce the LPS; mediated by TNF- secretion (P0.05), but no change in the amount of IL-8 groups (P0.05). The results showed that: using siRNA successfully transfected Ilk can affect the expression of Akt1, reduce the TNF- content of alpha cells, Ilk may be related to mouse MECs can be used as anti-inflammatory, target substrate In order to provide new ideas and data reference for the treatment of breast inflammation, a more in-depth study is carried out.

【作者单位】: 贵州大学动物科学学院;贵州省生化工程中心;河南金泰生物技术股份有限公司;
【基金】:国家自然科学基金项目(31260618;31470128)
【分类号】:R655.8

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本文编号:1551613

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