HMGB1在SAP大鼠肠免疫屏障损伤中的作用机制及清胰Ⅱ号的保护作用

发布时间：2018-03-01 17:18

  本文关键词： 胰腺炎 肠屏障 CD3+、CD4+、CD8+ HMGB1 流式细胞术　出处：《遵义医学院》2015年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：目的:通过建立SAP大鼠模型,检测HMGB1、D-乳酸、IL-1、IL-10及T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+凋亡率,探讨HMGB1的释放在大鼠SAP时肠黏膜免疫屏障损伤中的作用及机制,为急性胰腺炎治疗研究提供新的思路和理论依据。方法:将体重在200g-250g健康SD大鼠(雌雄不限)104只,随机分为五组:假手术组(A组,n=8只);SAP模型组(B组,n=24只);清胰Ⅱ号干预组(C组,n=24只);谷氨酰胺干预组(D组,n=24只);清胰Ⅱ号+谷氨酰胺干预组(E组,n=24只)。假手术组大鼠开腹后仅翻动肠管;采用胆胰管逆行注射5%牛磺胆酸钠建SAP模型;于SAP制模苏醒后予清胰Ⅱ号灌胃,建立清胰Ⅱ号干预组;于SAP制模苏醒后予谷氨酰胺灌胃,建立谷氨酰胺干预组;于SAP制模苏醒后予清胰Ⅱ号+谷氨酰胺灌胃,建立清胰Ⅱ号+谷氨酰胺干预组。每组于制模后按6h、12h、24h分成3个亚组,于上述时间点处死大鼠取静脉血、胰腺组织、回肠及回肠Peyer’s结,每时点取大鼠8只。以酶联免疫吸附试验(ELISA)测血清中HMGB1、D-乳酸、IL-1、IL-10的浓度;实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测肠组织HMGB1m RNA的表达;流式细胞术测小肠Peyer’s结T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+凋亡率;光镜观察胰腺病理变化,光镜及电镜观察肠黏膜病理变化。并对各组检测指标作统计学分析。结果:1.与A组比较,B组大鼠回肠HMGB1m RNA表达量、血清HMGB1、D-乳酸、IL-1、IL-10浓度以及Peyer’s结CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞凋亡率升高(P0.01),胰腺发生明显损伤(P0.01),且血清HMGB1浓度与胰腺损伤程度呈正相关(r=0.912,P0.01)。2.C组、D组、E组与B组比较,胰腺损伤程度减轻(P0.01,P0.05),各对应时间点回肠HMGB1m RNA表达量、血清HMGB1、D-乳酸、IL-1浓度以及Peyer’s结CD3+、CD4+、CD8+凋亡率下降(P0.01,P0.05);血清IL-10浓度升高(P0.01,P0.05)。3.E组与C组、D组比较,各检测指标无统计学意义(P0.05);4.C组与D组比较,各检测指标无统计学意义(P0.05)。5.B组大鼠12h、24h回肠HMGB1m RNA表达量、血清HMGB1、D-乳酸、IL-1、IL-10、以 CD3+、CD4+淋巴细胞凋亡率均较6h升高(P0.01,P0.05),CD8+淋巴细胞凋亡率6h与12h比无明显差异(P0.05),与24h比显著升高(P0.01);12h与24h相比,各指标均升高(P0.01,P0.05)。6.C、D、E组12h、24h各指标与6h相比,HMGB1m RNA、IL-1、IL-10、D-乳酸、HMGB1表达升高(P0.01,P0.05),CD3+、CD4+淋巴细胞凋亡率下降,有统计学意义(P0.01,P0.05),CD8+淋巴细胞凋亡率6h与12h比无明显差异(P0.05),与24h比显著升高(P0.01);12h、24h相比,HMGB1m RNA、IL-1、IL-10、D-乳酸、HMGB1表达升高(P0.01,P0.05),CD3+、CD4+、CD8+淋巴细胞凋亡率显著下降(P0.01)。结论:1、HMGB1参与了SAP的病程发展,且与SAP严重程度呈正相关。2、HMGB1可通过对T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+的调节,从细胞免疫途径介SAP时IBFD的发生。3、清胰Ⅱ号可通过降低HMGB1表达减轻肠免疫屏障损伤。
[Abstract]:Objective: to investigate the effect and mechanism of HMGB1 release on intestinal mucosal immune barrier injury in rats by establishing SAP rat model and detecting the apoptosis rate of IL-10 and T lymphocyte subgroup CD3 CD4 / CD8 in rat model of SAP. Methods: 104 healthy SD rats weighing 200g-250g (male and female) were used to treat acute pancreatitis. Five groups were randomly divided into five groups: sham operation group (n = 8) and SAP model group (n = 24), group B (n = 24), group C (n = 24), group D (n = 24), group D (n = 24), group E (n 24), group E (n = 24). Only the intestinal canal was turned over after laparotomy. The SAP model was established by retrograde injection of 5% sodium taurocholate into the gallbladder and pancreatic duct, the intervention group of Qingyi 鈪，

本文编号：1552838