七氟烷后处理改善失血性休克与复苏大鼠空间学习与记忆能力及其机制的研究
本文选题:七氟烷 切入点:后处理 出处:《安徽医科大学》2017年硕士论文 论文类型:学位论文
【摘要】:创伤(trauma)所致死亡率逐年上升,失血性休克(hemorrhage shock)是导致创伤死亡的首要因素。失血性休克是由于机体血容量的大量下降导致的的急性系统性循环功能衰竭,是一种危急的全身性病理生理过程。失血性休克可导致组织缺血缺氧,脑组织,尤其是海马组织对缺血缺氧更为敏感。尽管液体复苏是治疗失血性休克绝对首选的治疗方法,但液体复苏可导致再灌注损伤,如脑缺血再灌注损伤,从而加重海马神经元的损伤,导致认知功能的障碍。七氟烷(sevoflurane)作为一种新型的吸入麻醉剂的类型,由于其起效快,刺激性小,广泛应用于临床麻醉。大量研究证实七氟烷后处理对脑缺血再灌注损伤起到保护作用,因此,本研究采用大鼠失血性休克与复苏模型,研究七氟烷后处理对失血性休克与复苏大鼠是否能起到脑保护作用,并探讨其可能的机制。实验一七氟烷后处理改善失血性休克复苏大鼠空间学习与记忆能力及其对海马胆碱能神经元的影响目的研究七氟烷后处理对失血性休克复苏大鼠空间学习与记忆能力的影响及其是否通过保护海马胆碱能神经元而发挥作用。方法健康雄性SD大鼠,体重300-350克,采用随机分为5组(n=8):假手术组(sham),失血性休克与复苏组(shock),七氟烷后处理低剂量组(sevo1,1.2%),七氟烷后处理中剂量组(sevo2,2.4%)和七氟烷后处理高剂量组(sevo3,3.6%),每组8只。采用右侧颈总动脉放血30min,失血量达到大鼠总血容量40%,1h后经左侧颈静脉30min内回输全部释放的自体血的办法制备大鼠失血性休克与复苏模型。七氟烷后处理组分别在再灌注即刻吸入1.2%,2.4%和3.6%的七氟烷30min。各实验组每隔10min监测一次平均动脉压(MAP),并于放血前(T0)、放血结束后30min(T1)、再灌注前(T2)、再灌注后(T3)采集动脉血行血气分析。再灌注72h后使用Morris水迷宫实验检测大鼠的空间学习与记忆能力。随后处死大鼠,断头取脑组织,HE染色检测海马CA1区形态学变化,大鼠海马CA1区ACHE和CHAT表达采用免疫组化法检测。结果与sham组相比,其余各组T1-T2时间段MAP明显降低;血气分析显示与sham组相比T1,T2时Lac升高,BE、PH、HB及PCO2均显著降低。与sham组相比,shock及sevo1组潜伏期明显延长,且目标象限游泳距离及时间百分比均明显减少,海马CA1区出现大量的坏死的神经元,免疫组化结果显示海马CA1区CHAT表达减少,而ACHE表达增加(P0.05);与shock组相比,sevo2和sevo3组大鼠潜伏期明显缩短,且目标象限游泳距离及时间百分比均明显增加,海马CA1区坏死神经元明显减少,海马CHAT表达上调,而ACHE表达下降(P0.05)。结论2.4%和3.6%的七氟烷后处理可改善失血性休克与复苏大鼠空间学习与记忆能力,这种效应可能通过保护海马CA1区胆碱能神经元有关。实验二七氟烷后处理可通过抑制内质网应激介导的神经元凋亡而改善失血性休克复苏大鼠空间学习与记忆能力目的研究七氟烷后处理对大鼠失血性休克复苏大鼠空间学习与记忆能力的改善是否与抑制内质网应激介导的神经元凋亡有关。方法健康成年雄性SD大鼠,体重300-350克,随机分为3组(n=12):假手术组(sham),失血性休克与复苏组(shock),七氟烷后处理组(SP),模型建立及七氟烷后处理方法同实验一,各实验组每隔10min监测一次平均动脉压(MAP),并于放血前(T0)、放血结束后30min(T1)、再灌注前(T2)、再灌注后(T3)采集动脉血行血气分析。再灌注后3天各组随机取6只大鼠,利用水迷宫检测学习记忆能力,随后断头取脑组织,采用TUNEL法检测海马CA1区神经元细胞的凋亡情况。血液回输后72h各组取余下6只提取海马组织,采用Western blot法检测GRP78和CHOP蛋白的表达。结果与sham组相比,其余各组T1-T2时间段MAP明显降低,Lac升高,shock组逃避潜伏期及目标象限的时间百分和目标象限的游泳距离均明显降低。海马CA1区神经元凋亡数目增高,海马组织GRP78和CHOP蛋白表达上调(P0.05);与shock组相比,SP组大鼠逃避潜伏期明显降低,而目标象限游泳距离及目标象限时间百分比均明显增加,海马CA1区神经元凋亡数目减少,海马组织GRP78和CHOP蛋白表达下调。结论七氟烷后处理可改善失血性休克与复苏大鼠空间学习与记忆能力,可能与其降低神经元凋亡,抑制失血性休克与复苏导致的内质网应激有关。小结1.七氟烷后处理可改善失血性休克与复苏大鼠的空间学习与记忆能力,并呈现一定的剂量依赖性。2.七氟烷后处理可保护海马CA1区胆碱能神经元,提高失血性休克复苏大鼠的空间学习与记忆能力。3.七氟烷后处理抑制失血性休克与复苏大鼠内质网应激介导的海马神经元凋亡。
[Abstract]:......
【学位授予单位】:安徽医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2017
【分类号】:R614
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,本文编号:1600221
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