骨关节炎软骨中Ⅵ型胶原空间分布的变化规律及HtrA1在其中的作用

发布时间：2018-03-15 04:16

  本文选题：骨关节炎　切入点：软骨细胞周基质　出处：《中国人民解放军医学院》2015年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：目的：探讨Ⅵ型胶原蛋白在OA软骨中的空间分布较健康软骨Ⅵ型胶原的变化规律；其次通过研究HtrA1在OA软骨中的分布规律及其与Ⅵ型胶原分布改变的关系,探讨HtrA1在OA发病中的作用。方法：利用模型组Hartley豚鼠自发性骨关节炎模型和对照组健康组豚鼠,取膝关节软骨做冰冻切片,进行HE染色和Ⅵ型胶原免疫荧光染色,而后利用Delta-Vision Elite成像系统和Imaris软件进行断层扫描、3D重建和定量分析,比较模型组和对照组软骨组织的细胞数量和体积、Ⅵ型胶原的厚度与体积以及Ⅵ型胶原体积与细胞体积比值的差异：其次,利用以上模型及对照组,取膝关节软骨做石蜡切片,进行番红O染色、HtrA1免疫组化染色以及HtrA1、Ⅵ型胶原免疫荧光双染色,比较两组软骨在大体形态、HtrA1免疫组化染色阳性率等方面的差异以及HtrA1与Ⅵ型胶原分布关系。结果：正常软骨中,薄层Ⅵ型胶原层均匀包裹软骨细胞,各层细胞外Ⅵ型胶原层厚度无明显差别(P0.05),体积随细胞深度增加而增加(P0.01)：骨关节炎软骨中,Ⅵ型胶原体积减小(P0.01)且空间分布不规则,移行层呈蜂窝状或出现空洞,放射层中呈点、片状弥散分布,且在细胞周基质外出现散在的Ⅵ型胶原。随着软骨组织的退化,OA组番红0染色与健康对照组软骨相比,软骨细胞外基质中的蛋白多糖含量明显减少,且蛋白多糖多集中与软骨囊(PCM和TM)内,符合OA关节退化特征。正常关节软骨组织内HtrA1的染色阳性细胞数较少,且在移行层和放射层较表面层较多(P0.01)；OA软骨内HtrA1的染色阳性细胞数接近100%,各层细胞阳性率无明显差别(P0.05),且染色阳性的区域局限于胞核和胞质,胞外基质呈阴性。正常软骨中,移行层和放射层的Ⅵ型胶原和HtrA1共存：OA软骨中,移行层和放射层的Ⅵ型胶原分布不规则,且Ⅵ型胶原缺失的部位呈HtrA1荧光强阳性.表明HtrA1在Ⅵ型胶原分布的改变中有重要作用。结论：在骨关节炎软骨中Ⅵ型胶原体积减少,不完全包裹软骨细胞,出现蜂窝、空洞和弥散分布的现象；骨关节炎软骨中几乎所有软骨细胞分泌的HtrA1增多,且分布于胞质和胞核内,其有可能在Ⅵ型胶原空间分布的变化中发挥重要作用,并通过诱导软骨细胞分化和基质降解,促进关节软骨退化和OA形成。
[Abstract]:Objective: to investigate the spatial distribution of collagen 鈪，

本文编号：1614383