miR-155-5p通过调节SOX1的表达促进乳腺癌细胞系MCF-7的侵袭与迁移

发布时间：2018-05-03 02:03

  本文选题：乳腺癌 + MCF-　； 参考：《华中科技大学学报(医学版)》2017年05期

【摘要】：目的研究肿瘤相关微小RNA(microRNA,miRNA)miR-155-5p在乳腺癌细胞系MCF-7中调控性别决定区Y框蛋白1(sex determining region Y-box 1,SOX1)蛋白表达的机制,探讨其对MCF-7侵袭转移能力的影响。方法在乳腺癌细胞系MCF-7中上调或下调miR-155-5p的表达,采用小室迁移实验(Transwell)检测细胞的迁移、侵袭能力的改变;realtime PCR及Western blot法分别检测SOX1mRNA及蛋白表达水平;免疫荧光检测SOX1蛋白的分布及表达水平;双荧光素酶报告实验检测miR-155-5p与SOX1mRNA的3'-UTR结合情况。结果上调miR-155-5p,MCF-7细胞的侵袭与迁移能力增强,SOX1mRNA及蛋白表达水平下降(均P0.05);反之,抑制miR-155-5p,细胞的侵袭与迁移能力减弱,SOX1表达上升(均P0.05)。随后的双荧光素酶报告实验表明,miR-155-5p可与SOX1mRNA 3′-UTR端的特定序列结合,调控SOX1表达转录后水平。结论 miR-155-5p通过抑制SOX1的表达来促进乳腺癌细胞系MCF-7的侵袭与迁移。
[Abstract]:Objective to investigate the mechanism of microRNA-miRNA-miR-155-5p associated with tumor in regulating the expression of sex-determining Y frame protein (1(sex determining region Y-box 1) in breast cancer cell line MCF-7, and to explore its effect on the invasion and metastasis of MCF-7. Methods the expression of miR-155-5p was up-regulated or down-regulated in breast cancer cell line MCF-7. Cell migration was detected by transwell assay. The expression of SOX1mRNA and protein were detected by realtime PCR and Western blot respectively. The distribution and expression of SOX1 protein were detected by immunofluorescence, and the 3'-UTR binding between miR-155-5p and SOX1mRNA was detected by double luciferase report assay. Results upregulation of invasion and migration of miR-155-5pMCF7 cells enhanced the expression of SOX1 mRNA and protein (all P0.05A), whereas inhibition of miR-155-5p decreased the ability of invasion and migration of MCF-7 cells to decrease the expression of SOX1 (all P0.05A). The subsequent double luciferase report showed that miR-155-5p could bind to the specific sequence of SOX1mRNA 3'-UTR terminal and regulate the post-transcriptional level of SOX1 expression. Conclusion miR-155-5p can promote the invasion and migration of breast cancer cell line MCF-7 by inhibiting the expression of SOX1.
【作者单位】： 北京协和医院整形外科;华中科技大学同济医学院附属梨园医院皮肤美容科;华中科技大学同济医学院附属同济医院核医学科;
【分类号】：R737.9

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