脊髓损伤大鼠中触液神经元ERK5的表达情况分析

发布时间：2018-06-28 18:17

本文选题：脊髓损伤 + 触液神经元　；参考：《贵州医科大学》2017年硕士论文

【摘要】：目的:观察大鼠脊髓损伤后触液神经元(CSF-CNs)上ERK5表达水平的变化,探讨其与触液神经元的关系以及是否在脊髓损伤修复过程中发挥作用,通过利用信号转导通路为脊髓损伤的治疗提供新的实验基础和研究思路。方法:取成年健康SD雌性大鼠60只随机分为三组:实验组(脊髓损伤造模),假手术组(打开椎板,不作脊髓损伤造模)和对照组(不作处理)。采用改良Allen’s打击法建立大鼠胸10脊髓损伤模型,按照《大鼠脑立体坐标图谱》在处死大鼠前48h利用脑立体定位仪定位后,向单侧侧脑室注射霍乱毒素亚单位B结合辣根过氧化物酶(CB-HRP)3μl,分别在造模后1d、3d、7d、14d、28d时间点对实验大鼠进行BBB评分,评价后肢运动功能情况,各组于相同时间点取胸10上下1cm脊髓组织节段制作石蜡切片,利用免疫荧光技术检测触液神经元和磷酸化ERK5的表达情况,并以图像分析软件分析不同时间点两者的表达变化,得出数据用SPSS19.0统计软件进行分析。结果:1、BBB评分:实验组大鼠脊髓损伤造模后,后肢出现严重的运动功能障碍,双下肢瘫痪无自主活动,BBB评分为0分,以前3d最为严重,BBB评分约为0-2分,随着时间的延长,7-14d恢复较明显,后肢运动能力不同程度的恢复,28d左右趋于稳定,BBB评分约为16-20分。假手术组在前3d左右评分稍低于正常,约为19分,考虑因为背部创伤引起的疼痛导致老鼠活动受限,而对照组在前后的行为学评分中无明显变化,并且明显高于实验组的评分,假手术组、对照组在各时间点分别与实验组比较,BBB评分差异有统计学意义(P0.05);2、在脊髓组织中,实验组的触液神经元和磷酸化ERK5的阳性细胞表达水平在脊髓损伤后1d开始增高,随着时间的延长,7d左右上升到最大值,然后慢慢开始下降。假手术组和对照组的结果类似,阳性细胞表达水平较低,随着时间的推移,触液神经元和活化的ERK5阳性细胞表达处于比较稳定的状态,实验组各个时间点阳性细胞的表达与对照组和假手术组比较,差别有统计学意义(P0.05),而假手术组和对照组相比,差异无统计学意义(P0.05);假手术组和对照组中,CSF-CNs和磷酸化ERK5(p-ERK5)的共表达很少,各个时间点无明显差异。在实验组中,脊髓损伤后3d,CSF-CNs和p-ERK5双标阳性细胞开始增多,7d左右两者的共表达继续增加,14d左右CSF-CNs和p-ERK5的共表达达到最大值,在28d的时候共表达的阳性细胞有一定降低,在伤后3d、7d、14d、28d时间点上CSF-CNs和p-ERK5双标阳性细胞和对照组及假手术组比较,差异具有统计学意义(P0.05),损伤后1d点的共表达与对照组及假手术组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:侧脑室注射CB-HRP可以很好的标记CSF-CNs,且位置比较固定;大鼠脊髓损伤后CSF-CNs、p-ERK5和CSF-CNs/p-ERK5随着时间的变化表达明显增多,呈一个先上升再下降的趋势,表明急性脊髓损伤之后可能激活CSF-CNs上的ERK5信号通路,参与到后续神经元的分化和保护中,但是具体机制还有待进一步研究和探索。
[Abstract]:Objective : To observe the changes of ER5 expression level in cerebrospinal fluid ( CSF ) in rats after spinal cord injury in rats , and to explore the relationship between different time points and to provide a new experimental basis and research thought for the treatment of spinal cord injury . The results showed that the rats were divided into three groups : experimental group ( spinal cord injury model ) , sham operation group ( open vertebral plate , no spinal cord injury model ) and control group ( not treated ) . Compared with control group and sham operation group , there was no significant difference in the co - expression between the two groups ( P0.05 ) .
【学位授予单位】：贵州医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R651.2

【参考文献】